МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА КЛЕТОК КУПФЕРА ПРИ СОЧЕТАННОМ ПОСТУПЛЕНИИ В ОРГАНИЗМ БЕЛЫХ МЫШЕЙ АЦЕТАТА СВИНЦА И ЭРБИСОЛА

MORPHOLOGICAL CHARACTERISTICS OF KUPFFER CELLS WITH CONCOMITANT ENTERING THE ORGANIZM WHITE MICE OF THE LEAD ACETATE AND ERBISOL

Elena Kupsha

сandidate of medical sciences, associate professor of the Department of Histology and Embryology Medical Academy Crimean Federal University. V.I. Vernadsky,

Russia, Simferopol

Vladimir Bondarenko

candidate of medical sciences, associate professor of the Department of Histology and Embryology Medical Academy Crimean Federal University. V.I. Vernadsky,

Russia, Simferopol

АННОТАЦИЯ

При сочетанном поступлении в организм ацетата свинца и эрбисола, клетки Купфера отличаются хорошим представительством, выраженным полиморфизмом, функциональной активностью, без признаков самоповреждения. Мишенью для кислородзависимого киллинга являются единичные очаги перивазальных некрозов и фибриллогенеза. Локальные скопления моноцитарно-макрофагического дифферона визуализированы в двух сайтах – перивазальных некрозах и внутрисинусоидальных иммунных ассоциатах.

ABSTRACT

With the combined intake of lead acetate and Erbisol, Kupffer cells are characterized by a good representation, expressed polymorphism, functional activity without signs of self-harm. The target for the oxygen-dependent killing are single foci of necrosis perivasal and fibrillogenesis. Local accumulations of monocyte-macrophages differon visualized in two sites – the perivasal necrosis and immune intravascular associates.

Ключевые слова: Макрофаг, клетки Купфера, печень; свинец.

Keywords: Macrophage, Kupffer cells, liver; Pb.

Актуальной задачей современной медицины является определение необходимых условий для успешной реализации регенераторных потенций печени при токсических поражениях различной этиологии. Ключевым регуляторным фактором, обеспечивающим интегративную функцию между тканевыми составляющими внутри печеночной дольки, являются макрофаги, выявляющие морфотипическую и функциональную гетерогенность [4]. В зависимости от приоритета скэвенджерной функции или секреции цитокинов современными исследованиями установлены два основных морфотипа [3]. По функциональной категоризации макрофаги М1 являются провоспалительными, а — М2, оказывая противоположный эффект, участвуют в регенерации. Клетки Купфера относятся к М2 типу, в случае повреждения секретируя факторы, вызывающие рекрутирование моноцитов и лейкоцитов [1]. Также, в зависимости от происхождения, выделяют резидентные макрофаги, мигрировавшие в процессе эмбриогенеза из желточного мешка и моноцитарного костно-мозгового происхождения рекрутированные из кровеносного русла имеющие разный профибротический потенциал [2].

Целью нашей работы явилось определение морфологических маркеров характеризующие состояние моноцитарно/макрофагического дифферона в условиях свинцовой интоксикации и применении эрбисола.

Материал и методы.

Свинцовая интоксикация моделировалась на 6-ти половозрелых самцах белых мышей линии balb/c, которые получали перорально ацетат свинца в дозе 1мг/100 г массы и подкожные инъекции препарата «Эрбисол», в течение 30 суток. 5 животных служили контролем. Используемые методы: электронномикроскопический, полутонких срезов.

Результаты и обсуждение.

В синусоидных капиллярах 2-й зоны ацинуса преобладают клетки Купфера с признаками высокой функциональной активности. Они располагаются поодиночке, не образуя локальных скоплений. Нейтрофильные гранулоциты единичны (рис. 1.А).

Рисунок 1. (A, B, C – полутонкий срез. Толуидиновый синий. Ув. Х 400; D – электронная микрофотография. Ув. х 10000.)

Клетки Купфера отличаются выраженным полиморфизмом. Чаще они содержат крупные ядра со множеством инвагинаций, преобладанием эухроматина и 2–3 мелкими ядрышками. В других клетках отмечаются гиперхромные ядра. В цитоплазме этих клеток отмечается обилие эндосом и вакуолей, а на полюсе, контактирующем с очагом фибриллогенеза, визуализируются гетеролизосомы (рис. 1.D).

Довольно часто в отдельных дилатированных участках капилляров наблюдаются скопления клеток гематогенных дифферонов. Для их состава характерно наличие клеточных линий с выраженной иммунной активностью, таких как лимфоциты, плазмоциты, моноциты. Все они контактируют с купферовскими макрофагами и эндотелиоцитами в стенке синусоидного гемокапилляра (рис. 1.В). Введение эрбисола подопытным мышам на фоне ежедневной свинцовой интоксикации стимулирует клетки Купфера, которые с признаками высокой функциональной активности в значительных количествах выявлялись в синусоидных гемокапиллярах. Кроме того, обнаруживались внутрисосудистые ассоциаты, состоящие из высокоактивных в иммунном отношении клеток – регуляторов и эффекторов, которые образовывали тесные межклеточные контакты в системах: «антигенпредставляющая клетка Купфера – лимфоцит», «лимфоцит – лимфоцит», «лимфоцит – моноцит», «лимфоцит – плазмоцит». Эти внутрисинусоидальные иммунные клеточные скопления выявлялись только в гемокапиллярах, эндотелиальный слой которых был сохранен, что доказывает важность сохранения эндотелием своей нормальной структурно-функциональной организации в обеспечении межклеточных адгезивных и сигнальных взаимодействий. И, кроме того, проявляя свою иммунную цензорную и гистогенетическую регуляторную роль экстравазально, между гепатоцитами, визуализировались лимфоциты. При этом локализованный экстравазально в паренхиме лимфоцит опять-таки контактировал с макрофагом Купфера (рис. 1.В).

Элиминация тканевого детрита и нормализация межклеточных взаимодействий в зонах перивазальных некрозов осуществлялась, в первую очередь, макрофагами и моноцитами. Защитная реакция, при этом, включала миграцию и пролиферацию клеток моноцитарного дифферона (рис. 1.С). К адаптивно-компенсаторным реакциям можно отнести индуцированную эрбисолом активацию иммунного клеточного звена, которое, кроме функции надзора за состоянием антигенного благополучия в тканях, обладает способностью регулировать с помощью цитокинов морфогенетические процессы неиммунных соматических клеток.

Выводы.

1. Макрофагический дифферон, характеризуется хорошим представительством клеток с признаками высокой функциональной активностью и полиморфизмом, равномерно распределенных внутри печеночной дольки.
2. Вектор фагоцитоза клеток Купфера фиксируется на единичных перивазальных некрозах и сайтах фибриллогенеза, исключая признаки самопровреждения и избыточной агрессии кислородзависимого киллинга приводящей к значительной клеточной убыли гепатоцитов, что свидетельствует о благоприятном иммуномодулирующем эффекте эрбисола.
3. Скопления клеток моноцитарно-макрофагического дифферона локализованы в двух сайтах – единичных перивазальных некрозах и внутрисинусоидальных иммунных ассоциатах.
4. Применение эрбисола способствует сохранению локальной популяции клеток Купфера проявляющей, в большей мере, регуляторно-репликативные потенции в отношении паренхиматозных клеток.

Список литературы:

1. Davies LC. et al. Tissue-resident macrophages. // Nat. Immunol. – 2013. – № 14. – P. 986–995. doi: 10.1038/ni.2705.
2. Eckert et al. The complex myeloid network of the liver with diverse functional capacity at steady state and in inflammation // rontiers in Immunology.Antigen Presenting Cell Biology – 2015. – Vol. 6 – Р. 1-11. doi: 10.3389/fimmu.2015.00179.
3. Kinoshita M. et al. Characterization of two F4/80-positive Kupffer cell subsets by their function and phenotype in mice. // J Hepatol. – 2010. – № 53. – Р. 903–910. doi: 10.1016/j.jhep.2010.04.037.
4. Tacke F., Zimmermann Henning W. Macrophage heterogeneity in liver injury and fibrosis // J Hepatol. – 2014. – Vol. 60. – P. 1090–1096.