ВЛИЯНИЕ  4-ХЛОРФЕНИЛ-2-ГИДРОКСИ-4-ОКСО-2-БУТЕНОАТА  НА  СВЕРТЫВАНИЕ  КРОВИ

Старкова  Алла  Валентиновна

канд.  мед.наук,  старший  преподаватель  кафедры  физиологии  и  патологии  Пермской  государственной  фармацевтической  академии,  г.  Пермь

E-mail:  allaperm@  list.ru

Сыропятов  Борис  Яковлевич

д-р  мед.  наук,  зав.  кафедрой  физиологии  и  патологии,  проф.  Пермской  государственной  фармацевтической  академии,  г.  Пермь

E-mail:  syropyatov@mail.ru

Собин  Федор  Владимирович

канд.  фарм.  наук,старший  преподаватель  кафедры  фармацевтической  технологии  Пермской  государственной  фармацевтической  академии,  г.  Пермь

Пулина  Наталья  Алексеевна

д-р  фарм.  наук,  зав.  кафедрой  фармацевтической  технологии,  проф.  Пермской  государственной  фармацевтической  академии,  г.  Пермь

THE  INFLUENCE  OF  THE  4-CHLOROPHENYL-2-HYDROXY-4-OXO-2-BUTENOATE  THE  CLOTTING  OF  BLOOD

Starkova  Alla  Valentinovna

candidate  of  medical  Sciences,  senior  lecturer  of  the  Department  of  physiology  and  pathology  of  the  Perm  state  pharmaceutical  Academy,  str.  Perm

Syropyatov  Boris  Yakovlevich

doctor  of  medical  Sciences,  head  of  the  Department  of  physiology  and  pathology,  Professor.  Perm  state  pharmaceutical  Academy,  str.  Perm

Sobin  Fedor  Vladimirovich

candidate  of  segments  of  pharmaceutical  Sciences,the  senior  lecturer  of  the  Department  of  pharmaceutical  technology  of  the  Perm  state  pharmaceutical  Academy,  str.  Perm

Pulina  Natalia  Alekseevna

Dr.  Pharm.  Sciences,  head  of  the  Department  of  pharmaceutical  technology,  prof.  Perm  state  pharmaceutical  Academy,  str.  Perm

АННОТАЦИЯ

Целью  работы  было  исследование  влияния  на  свертывание  цельной  крови  4-хлорфенил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноата  (ФС-169)  invitro  и  invivo.  Исследование  проводилось  с  помощью  коагулометра  «Минилаб  701».  Invitroиспользовали  цитратную  (3,8  %)  кровь  беспородных  кроликов  в  соотношении  9:1.  Полученные  результаты  свидетельствуют  о  том,  что  ФС-169  invitro  снижает  свертываемость  крови  на  282,2  %,  что  сопоставимо  с  активностью  гепарина.  При  подкожном  введении  в  дозе  35  мг/кг  (1/40  от  ЛД₅₀)  через  30  мин  после  введения  свертываемость  снизилась  на  102,9  %,эффект  сохранялся  на  протяжении  2  час.  Вывод:  активность  вещества  ФС-169  invitro  и  invivo  сопоставима  с  активностью  гепарина.

ABSTRACT

The  aim  of  the  work  was  to  study  the  impact  on  the  clotting  of  blood  4-chlorophenyl-2-hydroxy-4-oxo-2-butenoate  (FS-169)  in  vitro  and  in  vivo.  The  study  was  conducted  with  the  help  of  «Minilab  701»  coagulometer.  In  vitro  used  Citrated  blood  (3,8  %)  outbred  rabbits  in  a  ratio  of  9:1.  The  obtained  results  testify  to  the  fact  that  the  FS-169  in  vitro  reduces  coagulability  of  the  blood  on  the  282,2  %,  which  is  comparable  with  the  activity  of  heparin.  When  injected  subcutaneously  in  a  dose  of  35  mg/kg  (1/40  of  LD50)  in  30  min  after  the  introduction  of  the  coagulation  decreased  by  102,9  %,  the  effect  lasted  for  2  hours.  Conclusion:  the  activity  of  the  substance  of  the  FS-169  in  vitro  and  in  vivo  comparable  with  the  activity  of  heparin.

Ключевые  слова:  4-хлорфенил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноат;прямые  антикоагулянты;  «Минилаб  701».

Keywords:  4-chlorophenyl-2-hydroxy-4-oxo-2-butenoate;  direct  anticoagulants;  «Minilab  701»  coagulometer.

Прямые  антикоагулянты  применяют  для  лечения  заболеваний,  обусловленных  тромбозом,  и  профилактики  тромбоэмболических  осложнений.  Однако  у  используемых  в  настоящее  время  препаратов  этой  группы  есть  ряд  недостатков,  ограничивающих  их  применение.  Наиболее  частыми  из  них  являются  реакции  в  местах  инъекций  (уплотнение,  раздражение,  боль,  гематома,  некрозы  кожи),  развитие  тромбоцитопении,  риск  геморрагических  осложнений,  усиление  тромбообразования  после  отмены  препарата,  высокая  стоимость  лечения  [4],  поэтому  поиск  новых  соединений,  обладающих  антикоагулянтной  активностью  является  актуальным.

Целью  работы  было  исследование  влияния  на  свертывание  цельной  крови  вещества  4-хлорфенил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноата  (ФС-169)  invitro  и  invivo.

Исследование  проводилось  с  помощью  коагулометра  «Минилаб  701»  [1].  Использовали  цитратную  (3,8  %)  кровь  беспородных  кроликов  в  соотношении  9:1.  Для  определения  активности  вещества  invitro  в  кювету  помещали  100  мкл  крови  и  добавляли  100  мкл.  0,2  %  раствора  исследуемого  вещества,  в  контролевместо  вещества  добавляли  100  мкл  изотонического  раствора  хлорида  натрия.  Затем  пробы  инкубировали  в  течение  60  сек.  Добавляли  100  мкл  1  %  раствора  хлорида  кальция  и  приступали  к  измерению.  В  качестве  препарата  сравнения  использовали  гепарин  в  концентрации  1  ЕД/мл  крови.  Результаты  обрабатывали  по  методу  Фишера-Стьюдента  [2].

При  исследовании  invitro  были  получены  следующие  данные  (табл.  1).

Таблица  1.

Влияние  на  свертывание  крови  соединения  ФС-169  и  гепарина  invitro

Р  —  в  сравнении  с  контролем

Из  полученных  результатов  видно,  что  соединение  ФС-169  invitro  удлиняет  время  свертывания  крови  на  282,2  %.  Его  эффективность  сопоставима  с  уровнем  активности  гепарина.

Было  проведено  определение  острой  токсичности  данного  соединения  [3].  Исследование  проводилось  на  лабораторных  мышах  массой  18—28  г.  Путь  введения  —  подкожный.  ЛД₅₀составила  1290  (1100—1500)  мг/кг.  Согласно  ГОСТ  12.1007-76,  соединение  относится  к  3  классу  токсичности,  то  есть  является  умеренно  токсичным  соединением.

Для  определения  активности  соединения  invivo  была  взята  доза  35  мг/кг  (1/40  от  ЛД₅₀).  Исследование  проводилось  на  беспородных  кроликах  с  помощью  коагулометра  «Минилаб  701».  Определялась  исходная  свертываемость  крови.  Для  исследования  использовали  цитратную  (3,8  %)  кровь  в  соотношении  9:1.  В  кювету  помещали  100  мкл  крови  и  добавляли  100  мкл  изотонического  раствора  хлорида  натрия.  Пробы  инкубировали  в  течение  60  сек,  затем  добавляли  100  мкл  1  %  раствора  хлорида  кальция.  Затем  подкожно  вводили  вещество  ФС-169.  Измерения  свертываемости  крови  проводили  с  интервалом  30  мин.  Результаты  приведены  в  табл.  2. 

Таблица  2.

Изменение  свертывания  крови  под  влиянием  ФС  169  invivo

Р  —  в  сравнении  с  исходной  свертываемостью

Как  видно  из  табл.  2,  при  подкожном  введении  вещество  достаточно  быстро  всасывается,  т.  к.  снижение  свертываемости  отмечается  уже  через  30  мин  после  подкожного  введения  вещества  и  вызывает  значительное  снижение  свертываемости  крови  на  протяжении  2  часов.

Таким  образом,  полученные  результаты  свидетельствуют  о  том,  что  4-хлорфенил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноатinvitro  снижает  свертываемость  крови  на  282,2  %,  что  сопоставимо  с  активностью  гепарина.  Вещество  обладает  умеренной  токсичностью.  Быстро  всасывается  при  подкожном  введении.  Снижает  активность  свертывания  крови  invivo  в  дозе,  составляющей  1/40  отЛД₅₀.  Максимальный  эффект  от  соединения  наблюдается  через  30  мин  и  составляет  102,9  %.  Сохраняет  активность  при  подкожном  введении  на  протяжении  2  часов. 

Список  литературы:

1. Анализатор  показателей  гемостаза  МИНИЛАБ  701.  Техническое  описание  и  инструкция  по  эксплуатации.  М.:  А/О  Юнимед, — 2002.  —  36  с.
2. Гублер  Е.В.,  Вычислительные  методы  анализа  и  распознавания  патологических  процессов,  —  Ленинград:  Медицина,  —  1978.  —  294  c.
3. Прозоровский  В.В.  Фармакология  и  токсикология,  №  4,  —  1978,  С.  497—502.
4. Тихилов  Р.М.,  Стойко  Ю.М.,  Замятин  М.Н.,  Божкова  С.А.  Профилактика  тромбоэмболических  осложнений  в  травматологии  и  ортопедии.  Методические  рекомендации  под  ред.акад.  РАМН  Ю.Л.  Шевченко.  М.  2006.  —  20  с.