ИЗУЧЕНИЕ  ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОГО  ДЕЙСТВИЯ  СУХОГО  ЭКТРАКТА  ИЗ  ФОРЗИЦИИ  ПОНИКШЕЙ  И  ОПРЕДЕЛЕНИЕ  ЕГО  ЭФФЕКТИВНОЙ  ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ  ДОЗЫ

Доркина  Елена  Григорьевна

д-р  биол.  наук,  доцент  ПМФИ-филиала  ВолгГМУ,  г.  Пятигорск

E-mail: 

Кобин  Антон  Алексеевич

аспирант  ПМФИ-филиала  ВолгГМУ,  г.  Пятигорск,

E-mail:  kobin@inbox.ru

Саджая  Любовь  Анатольевна

канд.  фарм.  наук,  ст.  преподаватель  ПМФИ-филиала  ВолгГМУ,  г.  Пятигорск

Количество  пациентов  с  патологией  печени  ежегодно  возрастает,  причем  увеличивается  число  больных  с  ее  токсическим  поражением.  Причиной  для  такого  роста  служит  бурное  развитие  различных  отраслей  промышленности,  в  том  числе  пищевой,  химической  и  фармацевтической,  современный  образ  жизни,  характер  питания,  а  также  увеличение  процента  лиц,  принимающих  лекарственные  препараты,  в  том  числе  неизвестного  производства,  наркотические  средства,  злоупотребляющих  алкоголем  и  его  суррогатами.  Попадая  в  организм  различными  путями,  гепатотоксические  агенты  нарушают  структуру  и  функцию  клеточных  мембран  гепатоцитов,  усиливают  процессы  перекисного  окисления  липидов,  изменяют  процессы  регенерации  и  функции  гепатоцитов.  Применение  гепатопротекторов  позволяет  снизить  повреждающее  действие  продуктов  перекисного  окисления  липидов  и  улучшить  репаративные  процессы  в  печени.

Форзиция  (лат.  Forsythia),  или  форсайтия,  или  форсиция  —  род  кустарников  и  небольших  деревьев  семейства  Маслиновые,  цветущих  красивыми  жёлтыми  цветами.  Форсайтия  плачущая  (Forsythia  suspensa)  —  одно  из  пятидесяти  основных  лекарственных  растений  китайской  народной  медицины.

Сухой  экстракт  (СЭ)  из  форзиции  поникшей  представляет  собой  весьма  сложную  по  химическому  составу  смесь  растительных  веществ,  самыми  значительными  из  которых  в  фармакологическом  плане  выступают  различные  полифенольные  соединения.  Плоды  содержат  лигнаны  (арктиин,  филлирин,  филлигенин,  форзитин,  пинорезинол,  матайрезинозид),  тритерпены  (олеаноловую,  урсоловую  и  бетулиновую  кислоты),  иридоиды  (форзитид,  форзитида  метиловый  эфир),  флавоноиды  (рутин  и  др.),  фенолы  (форзициазиды  A,  C,  D,  E,  суспензазид,  салидрозид).  Листья  содержат  фенолы  (форзитиазиды  А,  В,  С,  D).  Кроме  этого,  в  плодах  обнаружены  пинорезинол-О-b-D-глюкозид,  сложные  спирты  (корнозид,  ренгиол,  изоренгиол,  ренгиоксид,  ренгиолон,  ренгиозиды  А,  В,  С,  тритерпеноиды  (бетулиновая,  олеаноловая  и  урсоловая  кислоты,  О-ацетил-b-амирин,  О-ацетилизобауеренол,  3-О-ацетилдаммарен-24-диол-3b,20)  [4].

Плоды  в  китайской  медицине  считают  средством,  устраняющим  токсический  жар,  тормозящим  рост  опухолей,  новообразований,  затвердений.  По  другим  данным  порошок  и  отвар  корней  используют  как  жаропонижающее  и  противоинфекционное  средство,  антисептик  для  дезинфекции  мочевых  путей  [4].

Целью  нашего  исследования  явилось  установление  эффективной  дозы  сухого  экстракта  из  форзиции  поникшей  на  модели  поражения  печени  тетрахлорметаном.

Работа  выполнена  на  80  белых  беспородных  крысах-самках  с  массой  200—230  г.  Животные  получены  из  питомника  Пятигорского  медико-фармацевтического  института-филиала  ВолгГМУ,  прошли  двухнедельный  карантин  и  содержались  в  стандартных  условиях  вивария  при  естественном  освещении.

Во  время  эксперимента  животные  содержались  в  контролируемых  условиях:  температура  окружающего  воздуха  22±2˚С,  относительная  влажность  65±5  %.  Для  размещения  животных  применялись  макролоновые  клетки  Т-3  оборудованные  стальными  решетчатыми  крышками,  с  кормовым  углублением.  В  качестве  подстилочного  материала  применяли  контактные  автоклавированные  древесные  опилки  нехвойных  пород  древесины.  Кормление  выполнялось  в  фиксированное  время.  Вода  водопроводная  подавалась  в  стандартных  питьевых  бутылочках  (250  мл).

Подстилки,  клетки  и  аксессуары,  поилки  для  питья,  менялись  еженедельно,  мылись  и  дезинфицировались.  В  помещениях  содержания  животных  проводилась  ежедневная  влажная  уборка  с  дезсредствами,  ежемесячно  —  полная  санобработка.

Модель  острого  CCl₄  —  гепатоза  воспроизводили  путем  введения  per  os  трехкратно  через  день  50  %  раствора  тетрахлорметана  в  дозе  0,3  мл  /  100  г  массы  тела.  СЭ  вводили  per  os  в  дозах  50,  100,  300,  500  мг/кг.  Исследуемые  вещества  вводили  за  7  дней  до  введения  CCl₄  и  затем  на  фоне  воспроизведения  модели.

Поражение  печени  парацетамолом  проводили  двухкратным  введением  парацетамола  на  1  %  крахмальном  растворе  в  дозе  3,5  мг/кг  веса  животных.  Сухой  экстракт  вводили  в  дозе  300  мг/кг,  а  препарат  сравнения  карсил  в  дозе  100  мг/кг  перорально  в  течение  трех  дней.

Контролем  служили  животные,  которым  вводили  эквиобъемное  количество  растворителя.  Забой  животных  проводили  путем  декапитации  под  лёгким  эфирным  наркозом  через  сутки  после  последнего  введения.

Для  оценки  эффективности  гепатозащитного  действия  определяли  активности  ферментов  в  сыворотке  крови:  аланинаминотрансферазы  (АлАт)  по  методу  Reitman  S.  и  Frankel  S.  [2,  с.  111],  щелочной  фосфатазы  (ЩФ)  унифицированным  методом  по  «конечной  точке»,  также  определяли  содержание  общего  билирубина  (ОБ)  методом  Йендрашика  с  использованием  наборов  реактивов  «Ольвекс  Диагностикум»  [2,  с.  251].  Количество  триглицеридов  (ТРГ)  в  гомогенате  печени  (мкмоль/г)  измеряли  по  Gottfrieds  S.P.,  Rosenberg  B.  в  модификации  Сентебовой  [3].

Статистическую  обработку  результатов  проводили,  используя  t-критерий  Стъюдента  [1,  с.  78].

Результаты  экспериментальных  исследований  показали  (таблица  1),  что  при  остром  поражении  печени  тетрахлорметаном  наблюдается  развитие  в  печени  синдрома  цитолиза  (повышение  активности  АлАт  на  625  %);  холестаза  (повышение  активности  ЩФ  на  287  %  и  содержания  ОБ  на  326  %),  жировой  дистрофии  (накопление  ТРГ  +  886  %).

При  введении  СЭ  в  дозе  50  мг/кг  все  исследуемые  биохимические  показатели  достоверно  не  отличались  от  контроля  (СС1₄+растворитель).  При  увеличении  дозы  СЭ  до  100  мг/кг  наблюдалось  достоверное  снижение  активности  ЩФ  на  48  %,  содержания  ОБ  —  на  43  %  и  содержания  триглицеридов  в  печени  —  на  62  %  по  сравнению  с  контролем.  Но  активность  АлАт,  отражающая  интенсивность  цитолиза  гепатоцитов,  оставалась  на  уровне  нелеченных  животных.  При  лечебно-профилактическом  использовании  СЭ  из  форзиции  поникшей  в  дозе  300  мг/кг  активность  АлАт  достоверно  снизилась  на  44  %,  а  также  в  большей  степени  уменьшились  активность  ЩФ  (на  65  %),  содержание  ОБ  (на  62  %)  и  триглицеридов  в  печени  (на  69  %),  чем  при  введении  СЭ  в  дозе  100  мг/кг.

При  введении  СЭ  в  дозе  500  мг/кг  такие  показатели,  как  активности  АлАт,  ЩФ  и  содержание  ОБ  в  сыворотке  крови  снизились  несколько  в  меньшей  степени  (–36  %,  –60  %  и  –50  %  соответственно),  а  содержание  триглицеридов  в  печени  —  в  большей  степени  (–79  %),  чем  у  животных,  получавших  СЭ  в  дозе  300  мг/кг.  При  этом  достоверные  отличия  между  данными  группами  животных  отсутствовали,  хотя  содержание  триглицеридов  у  животных,  получавших  СЭ  в  дозе  500  мг/кг,  полностью  нормализовалось.  Таким  образом,  значительного  усиления  эффективности  СЭ  при  повышении  дозы  от  300  до  500  мг/кг  не  выявлено.

Это  позволяет  сделать  вывод,  что  при  поражении  печени  СС1₄  эффективная  доза  СЭ  из  форзиции  поникшей  составляет  300  мг/кг.

Таблица  1.

Влияние  лечебно-профилактического  применения  сухого  экстракта  из  форзиции  поникшей  в  различных  дозах  при  экспериментальной  патологии,  вызванной  тетрахлорметаном

Примечания:  Р_и  —  уровень  достоверной  разницы  по  отношению  к  интактным  значениям;  Р_к—  уровень  достоверной  разницы  по  отношению  к  контрольным  значениям;  n  —  количество  животных  в  группе

Изучение  гепатозащитного  действия  СЭ  из  форзиции  поникшей  в  дозах  300  и  500  мг/кг  было  также  проведено  на  модели  поражения  печени  парацетамолом.  Однако  в  ходе  эксперимента  летальность  животных,  получавших  СЭ  в  дозах  300  и  500  мг/кг,  составила  70—90  %,  что  было  выше,  чем  у  контрольной  группы  животных  (парацетамол  +  растворитель).  Возможно,  это  связано  с  тем,  что  СЭ  обладает  индуцирующим  действием  на  микросомальную  систему  печени,  что  может  способствовать  усилению  токсичности  парацетамола,  обусловленной  образованием  его  метаболита  —  N-ацетил-p-бензохинонимина.

Таким  образом,  в  результате  проведенных  исследований  можно  сделать  следующие  выводы.  При  токсическом  поражении  печени  тетрахлорметаном  СЭ  из  форзиции  поникшей  обладает  гепатозащитным  действием,  предотвращая  развитие  в  печени  синдромов  цитолиза,  холестаза  и  жировой  дистрофии.  Его  эффективной  дозой  является  доза  300  мг/кг.  При  поражении  печени  парацетамолом  не  установлено  защитное  действие  СЭ  из  форзиции  поникшей.

Список  литературы:

1. Беленький  М.П.  Элементы  количественной  оценки  фармакологического  эффекта,  2-е  изд.,  перераб.  и  доп.  —  Л.:  Медицина,  1963.  —  149  с.
2. Колб  В.Г.,  Камышников  В.С.  Справочник  по  клинической  химии.  Минск:  Беларусь,  1982.  —  336  с.
3. Сентебова  Н.А.  Предложения  по  унификации  методов  определения  триглицеридов  в  сыворотке  крови  /  Н.А.  Сентебова,  Н.В.  Салицкая  //  Унификация  лабораторных  методов  исследований.  —  М.:  1978.  —  Вып.  8.—  С.  67—75.
4. Шретер  А.И.,  Валентинов  Б.Г.  Природное  сырье  китайской  медицины.  М.:  Теревинф,  2004.  —  Т.  1.  [Электронный  ресурс]  —  Режим  доступа.  —  URL:  http://chinamed.ru/book/book_view.php?nn_herb=254  (дата  обращения:  03.02.2013).