ИЗУЧЕНИЕ ГЕПАТОПРОТЕКТОРНЫХ СВОЙСТВ НОВЫХ БИОФЛАВОНОИДНЫХ ПРЕПАРАТОВ

Харченко Юрий Алексеевич

Аспирант ФГБУ ВПО БГСХА им. В.Я.Горина, г. Белгород

Е-mail:

Поражения печени различной этиологии занимают значительное место в общей структуре заболеваний и являются достаточно широко распространенной патологией.

Проблема адекватной фармакологической коррекции заболеваний органов гепатобилиарной системы является одной из актуальных задач современной гепатологии. Для профилактики и лечения различных заболеваний печени все шире используются антиоксиданты. Они замедляют или полностью ингибируют процессы свободнорадикального окисления, действуют на стадии образования свободных радикалов, их связывания и разрушения, а также утилизации продуктов окисления, из которых образуются новые радикалы. Особое внимание уделяется антиоксидантам природного происхождения.

В настоящее время в клинической фармакологии в качестве специальных гепатопротекторных средств несомненный интерес представляют антиоксиданты флавоноидной структуры. Под термином флавоноиды (от латинского слова flavus— жёлтый, считается, чтопервые выделенные из растений флавоноиды имели желтую окраску, однако позднее установлено, что многие из них бесцветны) объединены различные соединения, генетически связанные друг с другом, но обладающие различ­ным фармакологическим действием. Флавоноиды широко распространены в растительном мире. Флавоноидсодержащие растения и препараты применяются в медицине и ветеринарии благодаря широкому спектру фармакологической активности, малой токсичности, а также также возможностью длительного применения без риска возникновения побочных реакций.

Флавоноиды способны как непосредственно захватывать свободные радикалы, так и участвовать в восстановлении других антиоксидантов. Непосредственное антиоксидантное действие флавоноидов реализуется за счет наличия в их структуре слабых фенольных гидроксильных групп, легко отдающих свой атом водорода при взаимодействии со свободными радикалами. Сами они превращаются в малоактивные феноксильные радикалы [3, с. 40].

Общепринятая классификация флавоноидов предусматривает их деление на классы, исходя из степени окислености центрального трёхуглеродного фрагмента (атомы С2, С3 и С4). Основными классами флавоноидов являются: флаваны, катехины, лейкоантоцианидины, антоцианидины, флаванононы, флавононолы, флавоны, флавонолы.

Исследование флавоноидных соединений коры лиственницы было начато в 70-х годах ХХ века [4, с. 478; 5, с. 623—629; 6, с. 3—17]. В коре лиственницы широко распространены гликозиды и сахарные эфиры оксикоричных кислот.

Исследования химического состава полифенольного комплекса коры лиственницы показали, что он является сложной смесью фенольных соединений [2, с. 5—13]. С помощью хроматографических методов полифенольный комплекс коры лиственницы можно разделить на фрак­ции: I — фенолокислоты и их эфиры; II — мономерные флавоноиды; III — спирофлавоноиды; IV — олигомерные и полимерные флавоноидные соединения. Содержание фракций составило: I — 7—10 %, II — 12—15 %; III — 35—40 % и IV — 40—45 % [1, с. 35—38].

Высокое содержание антиоксидантов в биофлавоноидном комплексе лиственницы позволяет предположить наличие у него защитных свойств в отношении мембран гепатоцитов при поступлении в организм гепатотропных ядов.

На модели экспериментального тетрахлорметанового токсического гепатита белых крыс нами совместно с учёными-химиками ЗАО «Петрохим» были изучены гепатопротекторные свойства побочного продукта, получаемого при производстве дигидроквер­тицина, названного биофлавоноидным комплексом лиственницы и проведено сравнение его действия с ларивитолом и гепатовексом.

В состав биофлавоноидногокомплекса лиственницы входят олиго­мер дигидрокверцетина, терпеновые углеводороды, эфиры смоляных кислот, фитостерины, биофлавоноиды (дигидрокемпферол, кемпферол, кверцетин, изорамнетин, листвинидин, спиробиофлавоноиды).

Ларивитол представляет собой сыпучую порошкообразную массу, содержит в своём составе биофлавоноидный комплекс листвен­ницы (20 мг/г), витамин А (500 МЕ/г), витамин Дз (250 МЕ/г), витамин Е (0,2 мг/г) и сорбент аэросил. Препарат также выпускает ЗАО «Петрохим» (Белгород).

Гепатовекс в своём составе содержит холин, метионин, сорбитол, витамин В12 и лизин.

Изучение гепатопротекторных свойств биофлавоноидного комплекса лиственницы проводили на белых беспородных крысах-самцах массой 160—180 г. Крысы были разделены на 5 групп по 10 голов в каждой. Первая группа служила контролем (интактные крысы). Острый токсический гепатит у крыс второй, третьей, четвёртой и пятой опытных групп вызывали внутрибрюшинным введением четырёххлористого углерода (ССl₄) на вазелиновом масле из расчёта 0,4 мл на 100 г массы тела в течение трех суток однократно. Третьей опытной группе сразу после окончания введения четыреххлористого углерода в течение 14 суток применяли биофлавоноидный комплекс лиственницы из расчёта 1 г/кг массы тела. Четвёртой опытной группе в течение такого же периода времени применяли ларивитол из расчёта 0,5 г/кг массы тела. Пятой группе в этот же период выпаивали гепатовекс из расчёта 1 мл/л воды.

Для оценки эффективности действия препаратов проводили клинический осмотр животных, измерение массы и контроль биохими­ческих показателей сыворотки крови (аланинаминотрансфераза, аспартатаминотрансфераза, креатинин, общий билирубин, щелочная фосфатаза, общий белок и т. д.). Биохимические исследования выполняли по стандартным методикам с использованием биохимического анализатора. Биохимические исследования сыворотки крови животных представлены в таблице 1.

Таблица 1.

Биохимические показатели крови крыс

Из представленных в таблице данных видно, что во второй группе под действием четырёххлористого углерода происходило существенное повышение таких показателей как аспартатаминотрансфераза и аланина­минотрансфераза (на 7,9 и 28,9 % по сравнению с контролем). Повышение активности трансаминаз в сыворотке крови является объективным показателем поражения паренхимы печени и повреждения плазматической мембраны. Цитолиз паренхимы печени сопровождается увеличением проницаемости клеточных мембран гепатоцитов и мембран клеточных органоидов. Эти ферменты являются «прямыми» маркерами поражения печёночных клеток, которые связаны с выходом внутриклеточных субстанций во внеклеточное пространство (кровь) из-за повышенной проницаемости мембран гепатоцитов или их гибели. Следует отметить, что при применении гепатопротекторных средств лишь в третьей опытной группе, где наряду с четырёххлористым углеро­дом использовали биофлавоноидный комплекс лиственницы, снижение показателей АСТ и АЛТ (на 2,7 и 2,3 % по сравнению с контролем) свидетельствует о высоком гепатопротекторном действии препарата.

Анализируя полученные результаты, следует отметить достовер­ное увеличение альбуминов и общего белка в сыворотке крови крыс третьей опытной группы, где наряду с четырёххлористым углеродом использовали биофлавоноидный комплекс лиственницы (на 25,2 и 5,6 % соответственно по сравнению с контролем). Увеличение уровня альбуминов следует оценить положительно, так как это указывает на качественное функционирование печени. Применение ларивитола и гепатовекса на фоне CCl₄также приводило к незначительному повышению концентрации альбумина (на 0,9 и 0,6 %) и общего белка (на 1,2 и 0,8 % соответственно) но, ни в одном из случаев разница с контролем не подтвердилась статистически.

Повышение уровня щелочной фосфатазы в группе отрицательного контроля (CCl₄) и в пятой (гепатовекс) опытной группе (на 5,0 и 3,9 % соответственно) также свидетельствует о поражении печени, которое сопровождается некрозом гепатоцитов. Использование ларивитола практически не оказывало влияния на данный показатель, приводя лишь к незначительному его снижению (на 0,6 %). После применения биофлавоноидного комплекса, щелочная фосфатаза наоборот снизилась (на 4,1 % по сравнению с контролем), что также свидетельствует о высокой лечебно-профилактической эффективности препарата.

Применение биофлавоноидного комплекса лиственницы на фоне CCl₄ практически вдвое снижало уровень общего билирубина (30,7 против 61,5 %) у подопытных животных. Следовательно, можно заключить, что гепатотропное действие биофлавоноидного комплекса лиственницы обусловлено его мембраностабилизирующим эффектом на эритроцитарный пул обмена билирубина.

Действие ларивитола и гепатовекса было менее эффективным и пос­ле их применения содержание билирубина было выше показателей ин­тактных животных на 34,6 и 38,5 % соответственно, однако эти изменения также свидетельствуют о мембраностабилизирующем действии препаратов.

На модели экспериментального токсического гепатита белых крыс нами были изучены гепатопротекторные свойства биофлавоноидного комплекса лиственницы и проведено его сравнение с ларивитолом и гепаптовексом.

Поступление четырёххлористого углерода в организм крыс приводило к развитию цитолитического (повышение в сыворотке крови содержания аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы), холестатического (повышение активности щелочной фосфатазы и концентрации билирубина), гепатодепрессивного (снижение общего белка и альбуминов) синдромов поражения печени.

Применение крысам биофлавоноидного комплекса лиственницы в дозе 1,0 г/кг массы тела на фоне экспериментального токсического гепа­тита оказывало выраженное гепатопротекторное действие, которое прояв­лялось уменьшением нарушений функционального состояния печени.

Использование ларивитола у подопытных животных четвёртой группы оказывало менее выраженное гепатопротекторное действие, но также приводило к нормализации уровня печёночных ферментов в сыворотке крови и нормализации функции печени.

Следует отметить, что применение гепатовекса оказало слабое положительное влияние на функцию печени подопытных крыс. Биохи­мические показатели крови животных, как и их масса в течение всего экспериментального периода незначительно отличалась от группы отри­цательного контроля, где крысам вводили четырёххлористый углерод.

На основании полученных данных можно сделать вывод, что биофлавоноидный комплекс лиственницы является перспективным гепатопротектором и требует дальнейшего детального изучения.

Список литературы:

1. Гордиенко И.И., Фёдорова Т.Е., Иванова С.З., Бабкин В.А. Влияние экстрагента на компонентный состав фенольного комплекса, извлекаемого из коры лиственницы Гмелина // Химия растительного сырья. 2008. № 2. С. 35—38.
2. Иванова С.З., Федорова Т.Е., Иванова Н.В., Федоров С.В., Остроухова Л.А., Малков Ю.А., Бабкин В.А. Флавоноидные соединения коры лиственницы сибирской и лиственницы Гмелина // Химия растительного сырья. 2002. № 4. — С. 5—13.
3. Накусов Т.Т. Влияние кверцетина и дигидрокверцетина на свободно­радикальные процессы в разных тканях крыс, подвергнутых гипоксической гипоксии: Дис. ... канд. биол. наук. Ростов-на-Дону, 2009.— 161 с.
4. Пашинина Л.Т., Чумбалов Т.К., Лейман З.А. Катехины коры Larix sibirica // Химия природных соединений. 1970. № 4. С. 478.
5. Пашинина Л.Т., Чумбалов Т.К., Лейман З.А. Лиственол — новый флавоноид коры Larix sibirica // Химия природных соединений. 1973.№ 4, 5.С. 623—629.
6. Тюкавкина Н.А., Лаптева К.И., Медведева С.А. Фенольные экстрактивные вещества рода Larix // Химия древесины. 1973. № 13, С. 3—17.