ФИТОХИМИЧЕСКОЕ  ИЗУЧЕНИЕ  DRACOCEPHALUM  ARGUNENSE  ДАЛЬНЕГО  ВОСТОКА

Cүлеймен  Ерлан  Мэлсұлы

канд.  хим.  наук,  PhD,  ГНС  института  прикладной  химии,

доцент  кафедры  химии  ЕНУ  им.  Л.Н.  Гумилева,  Республика  Казахстан,  г.  Астана

Е-mail: 

Искакова  Жанар  Бактыбаевна

канд.  хим.  наук,  ведущий  научный  сотрудник  института

прикладной  химии  ЕНУ  им.  Л.Н.  Гумилева,  Республика  Казахстан,  г.  Астана

Е-mail:  zhanariskakova@mail.ru

Дудкин  Роман  Васильевич

канд.  биол.  наук,  научный  сотрудник  Тихоокеанского  института  биоорганической  химии  ДВО  РАН;доцент  Дальневосточного  федерального  университета;  ведущий  научный  сотрудник  Ботанического  сада-института  ДВО  РАН,  Россия,  г.  Владивосток

Е-mail: 

Горовой  Петр  Григорьевич

академик,  профессор,  лаборатория  хемотаксономии  Тихоокеанского  института  биоорганической  химии  ДВО  РАН,  Россия,  г.  Владивосток

Е-mail: 

PHYTOCHEMICAL INVESTIGATION OF DRACOCEPHALUM ARGUNENSE FROM FAR EAST

Suleimen Yerlan Melsuly

candidate of Chem. Science, PhD, Chief Researcher of the Institute of Applied Chemistry of ENU, Associate Professor of Chemistry Department of L.N. Gumilev ENU, Republic of Kazakstan, Astana

Iskakova Zhanar Baktybaevna

candidate of Chem. Science, Leading Researcher of the Institute of Applied Chemistry of ENU, Republic of Kazakstan, Astana

Doudkin Roman Vasil’evich

candidate. biol. Sciences, Pacific Institute of Bioorganic Chemistry, Associate Professor of the Far Eastern Federal University, Botanical Garden-Institute, Leading staff scientist FEB RAS, Russia, Vladivostok

Gorovoy Petr Grigor’evich

fcademician, Professor, Laboratory of Chemotaxonomy, Pacific Institute of Bioorganic Chemistry, Russia, Vladivostok

Благодарность

Авторы  выражают  благодарность  доктору  М.  Джакоб  (Университет  Миссиссипи,  США)  за  помощь  в  исследовании  антимикробной  активности  (грант  №  AI  27094  NIH,  NIAID,  Division  of  AIDS,  грант  №  58-6408-1-603  USDA  Agricultural  Research  Service  Specific  Cooperative  Agreement).  Работа  выполнена  по  гранту  Министерство  образования  и  Республики  Казахстан  по  бюджетным  программам  №  055  «Фундаментальные  и  прикладные  исследования»  по  теме  «Фитохимическое  изучение  растений  Казахстана  и  Сибири.  Создание  модифицированных  производных  на  основе  моно-  и  сесквитерпеноидов,флаваноидов  и  их  биоскрининг»  и  «Создание  образцов  продукции  под  брендом  «Ароматы  степей  Казахстана».

АННОТАЦИЯ

Получен  экстракт  Dracocephalum  argusense.  Результаты  исследований  показали  выраженную  активность  экстракта  против  Staphylococcus  aureus  —  66  %  и  устойчивого  к  метициллину  Staphylococcus  aureus  (MRSa)  —  100  %,  выявилась  противогрибковая  активность  экстракта  относительно  C.  neoformans.  Исследования  цитотоксичной  активности  показали,  что  экстракт  не  является  цитотоксичным  в  отношении  рачков  Artemia  salina.

ABSTRACT

The  Extract  from  of  Dracocephalum  argunense  was  obtained.  The  results  showed  pronounced  activity  of  the  extract  against  Staphylococcus  aureus  —  66  %  and  methicillin-resistant  Staphylococcus  aureus  (MRSa)  —  100  %,  the  antifungal  activity  of  the  extract  revealed  relatively  C.  neoformans.  Cytotoxic  activity  studies  have  shown  that  the  extract  is  not  cytotoxic  against  Artemia  salina  crustaceans.

Ключевые  слова:  Dracocephalum  argunense;  Lamiaceae;  экстракт;  антимикробная  активность;  цитотоксическая  активность;  Artemia  salina.

Keywords:  Dracocephalum  argunense;  Lamiaceae;  extract;  antimicrobial  activity;  cytotoxical  activity;  Artemia  salina.

Целью  работы  явилось  фитохимическое  изучение  растения  Dracocephalum  argunense  Fischer  ex  Link.

Dracocephalum  argunense  Fischer  ex  Link  (змееголовник  аргунский)  —  травянистое  растение  семейства  Lamiaceae,  произрастающее  на  Дальнем  Востоке  России,  в  Японии,  Китае,  полуострове  Корея.  Растет  на  галечниках  морского  берега  и  по  сухим  каменистым  склонам  [2].

Ранее  нами  было  изучено  анатомическое  строение  данного  растения  [1].

Целевой  продукт  —  экстракт  растения  Dracocephalum  argunense  —  получен  из  надземной  части  этого  растения  методом  хлороформной  экстракции  и  представляет  собой  густую  неподвижную  массу  темно-зеленого  цвета  с  характерным  запахом.

Нами  разработан  способ  получения  экстракта  Dracocephalum  argunense,  обладающий  выраженной  антибактериальной  активностью  против  штаммов  Staphylococcus  aureus  и  устойчивого  к  метициллину  Staphylococcus  aureus  (MRSa),  проявляющий  противогрибковую  активность  относительно  C.  neoformans,  а  также  не  являющийся  токсичным  при  концентрации  2,5  мг/мл. 

Получение  экстракта  Dracocephalum  argunense. 

Растение  было  собрано  в  Приморском  Крае,  Лазовском  районе,  на  сухом  лугу  близ  устья  реки  Киевка  26    июля  2012  года.  Гербарный  код:  103589.

Сухое  и  измельченное  сырье  (900  г)  помещали  в  колбу  для  экстракции,  заливали  хлороформом  до  появления  «зеркала»  (ровной  поверхности  жидкости  над  сырьем),  оставляли  для  экстрагирования  на  сутки.  Полученный  экстракт  отфильтровывали  в  предварительно  взвешенную  круглодонную  колбу,  упаривали  досуха  на  роторном  испарителе.  Экстракцию  проводили  трижды.  Полученный  экстракт  обработали  70  %  спиртом,  фильтрат  извлекали  хлороформом. 

Выход  составил  0,28  %. 

Экстракт  испытывали  на  антимикробную  и  антигрибковую  активность  —  способность  ингибировать  рост  из  5  бактерий  и  5  грибков,  патогенных  для  человека  (таблица  1).

Таблица  1. 

Лист  штаммов  микроорганизмов

Образец  испытывали  в  первичном  скрининге  на  50  мкг/мл,  процент  ингибирования  роста  (%  инг.)  рассчитывали  по  отношению  к  отрицательному  и  положительному  контролю.  Так  как  экстракт  показал  активность  >  50  %,  его  направили  на  вторичный  скрининг.

В  качестве  контроля  как  противогрибкового  препарата  использовали  амфотерицин  В  и  как  антибактериальный  препарат  —  ципрофлоксацин.

Результаты  исследований  первичного  скрининга  показали  выраженную  активность  экстракта  Dracocephalum  argunense  против  Staphylococcus  aureus  (стафилококк  золотистый)  —  66  %  и  устойчивого  к  метициллину  Staphylococcus  aureus  (MRSa)  —  100  %  (таблица  2).

Во  вторичном  скрининге  образцы  растворяли  в  20  мг/мл  и  проверяли  при  50,  10  и  2  мкг/мл  и  IC₅₀s  против  всех  10  штаммов  микроорганизмов.  Образцы  растворяли  в  2  мг/мл  и  проводили  испытания  на  20,  4,  0.8  мкг/мл  и  IC₅₀s  против  всех  10  штаммов  микроорганизмов. 

Результаты  исследований  вторичного  скрининга  подтвердили  показания  первичного  скрининга  о  высокой  антибактериальной  активности  экстракта  Dracocephalum  argunense  против  Staphylococcus  aureus  (стафилококк  золотистый)  и  устойчивого  к  метициллину  Staphylococcus  aureus  (MRSa),  кроме  того  выявилась  противогрибковая  активность  экстракта  относительно  C.  neoformans  (Таблица  3). 

Таблица  2. 

Результаты  исследования  антибактериальной  и  противогрибковой  активности  (первичный  скрининг)

Таблица  3. 

Результаты  исследования  антибактериальной  и  противогрибковой  активности  (вторичный  скрининг)

Проведены  исследования  цитотоксичной  активности  экстракта  Dracocephalum  argunense  на  рачках  Artemia  salina.  Готовили  образцы  экстракта  следующих  концентраций:  10,0;  5,0  и  2,5  мг/мл  (таблицы  4,  5,  6).

Таблица  4. 

Цитотоксическая  активность  экстракта  Dracocephalum  argunense  (10,0  мг/мл)

Таблица  5. 

Цитотоксическая  активность  экстракта  Dracocephalum  argunense  (5,0  мг/мл)

Таблица  6. 

Цитотоксическая  активность  экстракта  Dracocephalum  argunense  (2,5  мг/мл)

В  качестве  контроля  использовали  раствор  диметилсульфоксида. 

Исследования  показали,  что  экстракт  Dracocephalum  argunense  не  является  токсичным  при  концентрациях  2,5  мг/мл  и  5,0  мг/мл,  при  концентрации  10,0  мг/мл  оказывает  слаботоксичное  действие. 

Список  литературы:

1. Ишмуратова  М.Ю.,  Cүлеймен  Е.М.,  Дудкин  Р.В.,  Горовой  П.Г.  Анатомическое  строение  Dracocephalum  argunense  Fisch.  ex  Link  и  Scutellaria  regeliana  Nakai  из  Дальнего  Востока  /  Труды  XVIIІ  Международной  научно-практической  конференции  «Естественные  и  математические  науки  в  современном  мире»,  Россия,  г.  Новосибирск,  6  мая  2014  г.
2. Пробатова  Н.С.  Сем.  Яснотковые  —  Lamiaceae  //  Сосудистые  растения  советского  Дальнего  Востока.  Т.  7  /  Отв.  Ред.  С.С.  Харкевич.  СПб.:  Наука,  1995.  —  С.  294—378.