АНТИРАДИКАЛЬНАЯ  АКТИВНОСТЬ  ЭКСТРАКТОВ  И  АНАТОМИЧЕСКОЕ  СТРОЕНИЕ  PHLOMOIDES  ALPINA  (PALL.)  ADYLOV,  KAMELIN  &  MAKHM.   ИЗ  КАЗАХСТАНА

Молдахметова  Гүлжан  Куандыковна

младший  научный  сотрудник  института  прикладной  химии,  студентка  4  курса  кафедры  химии  ЕНУ  им.  Л.Н.  Гумилева,  Республика  Казахстан,  г.  Астана

Е-mail:  

">

Ишмуратова  Маргарита  Юлаевна

канд.  биол .  наук,  доцент  кафедры  фармацевтических  дисциплин

Карагандинского  университета  «Болашак»,  Республика  Казахстан,  г.  Караганды

Е-mail: 

Искакова  Жанар  Бактыбаевна

канд.  хим.  наук ,  ведущий  научный  сотрудник  института

прикладной  химии  ЕНУ  им.  Л.Н.  Гумилева,  Республика  Казахстан,  г.  Астана

Е-mail:   zhanariskakova@mail.ru

Джалмаханбетова  Роза  Илемисовна

д-р  хим.  наук ,  ВНС  института  прикладной  химии  ЕНУ  им.  Л.Н.  Гумилева,  Республика  Казахстан,  г.  Астана

Е-mail: 

">rozadichem@mail.ru

Cүлеймен  Ерлан  Мэлсұлы

канд.  хим.  наук ,  PhD,  ГНС  института  прикладной  химии,  доцент  кафедры  химии  ЕНУ  им.  Л.Н.  Гумилева,  Республика  Казахстан,  г.  Астана

Е-mail:  

ANTIRADICAL  ACTIVITY  OF  EXTRACTS  AND  ANATOMICAL  STRUCTURE  OF  PHLOMOIDES  ALPINA  (PALL.)  ADYLOV,  KAMELIN  &  MAKHM.  FROM  KAZAKHSTAN

Moldahmetova  Gulzhan  Kuandykovna

j unior  Researcher  of  the  Institute  of  Applied  Chemistry  of  ENU,  4th  year  student  of  the  Chemistry  Department  of  L.N.  Gumilev  ENU,  Republic  of  Kazakstan,  Astana

Ishmuratova  Margarita  Yulaevna

candidate  of  biol.  Sciences,  assistant  Professor  of  Pharmaceutical  Sciences

Karaganda  University  "Bolashak",  Republic  of  Kazakstan,  Karagandy

Iskakova  Zhanar  Baktybaevna

candidate  of  Chem.  Science ,  Leading  Researcher  of  the  Institute  of  Applied  Chemistry  of  ENU,  Republic  of  Kazakstan,  Astana

J almakhanbetova  Roza  Ilemisovna

doctor  of  Chem.  Science,  Leading  Researcher  of  the  Institute  of  Applied  Chemistry  of  ENU,  Republic  of  Kazakstan,  Astana

Suleimen  Yerlan  Melsuly

c andidate  of  Chem.  Science,  PhD,  Chief  Researcher  of  the  Institute  of  Applied  Chemistry  of  ENU,  Associate  Professor  of  Chemistry  Department  of  L.N.  Gumilev  ENU,  Republic  of  Kazakstan,  Astana

Благодарность

Работа  выполнена  по  грантам  МОН  РК  по  бюджетным  программам  055  «Фундаментальные  и  прикладные  научные  исследования»  по  теме  «Фитохимическое  изучение  растений  Казахстана  и  Сибири.  Создание  модифицированных  производных  на  основе  моно-  и  сесквитерпеноидов,  флаваноидов  и  их  биоскрининг»  и  «Создание  образцов  продукции  под  брендом  «Ароматы  степей  Казахстана».

АННОТАЦИЯ

Проведено  изучение  антирадикальной  активности  наработанных  экстрактов  Phlomoides  alpina  (Pall.)  Adylov,  Kamelin  &  Makhm. ,  изучено  анатомическое  строение  растения.

ABSTRACT

The  study  of  antiradical  activity  of  Phlomoides  alpina  (Pall.)  Adylov,  Kamelin  &  Makhm.   extracts  and  anatomy  structure  of  plant  material  was  done.

Ключевые  слова:  антирадикальная  активность;  DPPH;  анатомическое  строение;  экстракт;  Phlomoides  alpina  (Pall.)  Adylov;  Kamelin  &  Makhm.

Keywords:  antiradical  activity;  DPPH;  anatomical  structure;  extract;  Phlomoides  alpina  (Pall.)  Adylov;  Kamelin  &  Makhm.

Материалом  для  настоящего  исследования  является  многолетнее  растение  Phlomoides  alpina  (Pall.)  Adylov,  Kamelin  &  Makhm.  (зопник  альпийский)  семейства  Lamiaceae  Lindl.  Принадлежность  к  этому  семейству  объясняет  ярко  выраженный  аромат,  который  определяется  присутствием  на  всех  или  на  некоторых  частях  растения  желёзок,  выделяющих  эфирные  масла  сложного  состава  (в  них  входят  ароматические  спирты,  фенолы,  терпены,  альдегиды  и  другие  органические  соединения).  Именно  присутствием  этих  масел  в  значительной  степени  определяется  практическое  использование  губоцветных  в  качестве  технических,  лекарственных  и  ароматических  растений.  Это  растение  не  образует  зарослей,  встречается  рассеянно  небольшими  группами  из  нескольких  особей.  Местом  распространения  является  среднегорные  и  высокогорные  луга  Республики  Алтай,  Средней  и  Восточной  Азии  [5].

Исходное  сырье  собрано  в  высокогорье  хребта  Ивановский.  Сроки  заготовок  —  конец  июля  —  первая  декада  августа  2012  г.

Объектом  же  исследования  являются  сухие  экстракты  листьев  и  цветков,  в  качестве  экстрагентов  были  использованы  гексан,  этилацетат  и  бутанол.

Целью  работы  явилось  изучение  антирадикальной  активности  гексанового,  этилацетатного  и  бутанольного  экстрактов  растения  Ph.  alpina  и  исследование  анатомического  строения  растения. 

Экстракция.  Мелкоизмельченную  надземную  часть  (листья,  цветочные  корзинки)  Ph.  аlpina  экстрагировали  со  смесью  хлороформа  и  спирта.  Экстракция  проводилась  3-х-кратно,  соотношение  сырье-экстрагент  1:10.  Хлороформно-спиртовое  извлечение  объединяли  и  упаривали  на  роторном  испарителе.  Полученную  сумму  экстрактивных  веществ  далее  подвергали  экстракцией  гексаном,  этилацетатом  и  бутанолом. 

Методика  исследования  антирадикальной  активности.   Для  определения  ингибирования  2,2-дифенил-1-пикрилгидразилрадикала  к  0,1  мл  исследуемого  образца  в  диапазоне  концентраций  0,1;  0,25;  0,5;  0,75;  1  мг/мл  добавляли  3  мл  6×10‾⁵  М  раствора  радикала.  Центрифужные  пробирки  находились  в  штативе,  завернутого  в  черный  полиэтилен.  После  интенсивного  перемешивания  растворы  оставлялись  в  темноте  и  через  30  минут  производили  измерение  оптической  плотности  при  длине  волны  520  нм.  Значения  величины  антирадикальной  активности  (АРА)  исследуемых  объектов  определяли  по  формуле:

АРА  (%)=А₀-А_t  /А₀×100,

где:  А₀  —  оптическая  плотность  контрольной  пробы; 

А_t  —  оптическая  плотность  рабочего  раствора  [6].

Измерение  оптической  плотности  исследуемых  экстрактов  производили  при  520  нм  на  приборе  Cary  60.  Антирадикальную  активность  исследуемых  экстрактов  сравнивали  с  антирадикальной  активностью  бутилгидроксианизола  (BHA).  Значения  исследуемых  экстрактов  антирадикального  эффекта,  рассчитанные  по  формуле,  приведены  в  таблице  1.

Таблица  1. 

Антирадикальная  активность  (%)  экстрактов  при  разных  концентрациях

На  основании  полученных  данных  (табл.  1)  и  графика  (рис.  1)  видно,  что  все  исследованные  экстракты  Ph.  alpina  имеют  невысокую  антирадикальную  активность  по  сравнению  с  ВНА.

Рисунок  1.   Динамика  антирадикальной  активности  при  изменении  концентрации  образцов

Нами  установлено,  что  среди  трех  экстрактов  Ph.  alpina  низкой  антирадикальной  активностью  обладает  гексановый  экстракт  (PhA-1),  средней  антирадикальной  активностью  —  этилацетатный  экстракт  (PhA-2),  а  бутанольный  экстракт  (PhA-3)  в  концентрациях  0,1  и  0,25  мг/мл  имеет  минимальную  оптическую  плотность,  но  затем  при  концентрациях  0,5;  0,75  и  1,0  мг/мл  значительно  увеличивается.

Таким  образом,  на  основании  полученных  данных  установлено,  что  все  исследованные  экстракты  Phlomoides  alpina  имеют  не  высокую  антирадикальную  активность  по  сравнению  с  ВНА.

Анатомическое  исследование  Phlomoides  alpina. 

Материалы  и  методы.  Объектом  исследования  являлись  надземные  части  (листья  и  стебли)  Ph.  alpina,  собранного  в  фазе  плодоношения. 

При  исследовании  Ph.  alpina  сухие  образцы  сырья  размачивали  в  горячей  воде  и  размягчали  в  смеси  глицерин-спирт-вода  дистиллированная  в  соотношении  1:1:1  [2,  4],  кипятили  в  5  %-ном  водном  растворе  гидроксида  калия.  Изготавливали  поверхностные  препараты  и  срезы  вручную.  Рисунки  выполняли  при  помощи  аппарата  РА-4М.  При  описании  анатомического  строения  использовали  принципы,  изложенные  в  трудах  В.Н.  Вехова,  Л.И.  Лотовой  [1,  3].

Анатомия.  Клетки  нижнего  эпидермиса  извилисто-стенные,  верхнего  эпидермиса  —  прозенхимные,  прямостенные  (рис.  2).  Устьица  аномоцитного  типа  (окружены  4  и  более  клетками  эпидермы)  и  встречаются  на  обеих  сторонах  листа,  но  преобладают  на  нижней.  Листья  опушены  простыми  многоклеточными  трихомами,  крупными,  стенки  их  утолщены,  некоторые  трихомы  имеют  коленный  изгиб.  Эфирно-масличные  железки  округлой  формы,  крупные,  темно-окрашенные,  приподнимаются  над  поверхностью  эпидермиса. 

Рисунок  2.  Препарат  листа  Ph .  alpina  с  поверхности.  Ув.  15х10:  А  —  нижний  эпидермис,  Б  —  верхний  эпидермис,  1  —  основные  клетки  эпидермы,  2  —  эфирно-масличные  железки,  3  —  устьица,  4  —  простые  многоклеточные  трихомы

Чашелистники  крупные,  сросшиеся  в  трубку  с  зубчатыми  отгибами.  Эпидермис  внешнего  края  состоит  из  округлых  или  протяженных  клеток  с  извилистыми  стенками.  Поверхность  не  густо  опушена  длинными  многоклеточными  простыми  трихомами  (рис.  3). 

Рисунок  3.  Эпидермис  чашелистника  Ph .  alpina  с  поверхности.  Ув.  15х10:  1  —  основные  клетки  эпидермиса,  2  —  трихомы

Стебель  на  поперечном  срезе  4-гранный  (рис.  4),  полый  внутри.  Периферическая  часть  покрыта  1-слойным  эпидермисом,  под  ним  в  углах  находятся  участки  уголковой  колленхимы,  между  углами  2—3  слоя  ассимиляционной  ткани  хлоренхимы.  Центральный  цилиндр  отделен  от  коровой  зоны  слоем  эндодермы,  клетки  которого  тангентально  утолщенные.  Проводящая  система  пучкового  типа.  Пучки  многочисленные,  мелкие,  образуют  кольцевую  зону;  коллатерального  типа  (флоэма  снаружи,  ксилема  внутри),  закрытые  (камбий  отсутствует). 

Рисунок  4 .  Схема  поперечного  среза  стебля  Ph.  alpina.  Ув.  15х10:  1  —  эпидермис,  2  —  колленхима,  3  —  хлоренхима,  4  —  флоэма,  5  —  ксилема,  6  —  эндодерма,  7  —  внутренняя  полость

Таким  образом,  диагностическими  признаками  сырья  Phlomoides  alpina  (Pall.)  Adylov,  Kamelin  &  Makhm.  являются  форма  клеток  эпидермиса  листа  и  стебля,  округлые  эфирно-масличные  железки,  форма  и  строение  кроющих  трихом. 

Список  литературы:

1.Вехов  В.Н.,  Лотова  Л.И.,  Филин  В.Р.  Практикум  по  анатомии  и  морфологии  высших  растений.  М.:  МГУ,  1980.  —  560  с.

2.Долгова  А.А.,  Ладыгина  Е.Я.  Руководство  к  практическим  занятиям  по  фармакогнозии.  М.:  Медицина,  1977.  —  255  с.

3.Лотова  Л.И.  Ботаника:  Морфология  и  анатомия  высших  растений.  М.:  КомКнига,  2007.  —  512  с.

4.Прозина  М.Н.  Ботаническая  микротехника.  М.:  Высшая  школа,  1960.  —  206  с.

5.Тахтаджяна  А.Л.  Жизнь  растений.  М.:  Просвещение,  1974.  —  47  с.

6.Sawant  O.,  Kadam  V.J.,  Ghosh  R.  In  vitro  Free  Radical  Scavenging  and  Antioxidant  Activity  of  Adiantum  lunulatum  //  Journal  of  Herbal  Medicine  and  Toxicology.  —  2009.  —  №  3(2).  —  P.  39—44.