ДИАГНОСТИКА  ДИРОФИЛЯРИОЗА  (DIROFILARIA  IMMITIS)  ГОРОДСКИХ  СОБАК

Коколова  Людмила  Михайловна

д-р  вет.  наук,  заведующая  лабораторией  гельминтологии

Якутский  научно-исследовательский  институт  сельского  хозяйства,  РФ,  г.  Якутск

E-mail:  kokolova_lm@mail.ru

Касьянова  Сардана  Степановна

аспирант  лаборатории  гельминтологии,  Якутский  научно-исследовательский  институт  сельского  хозяйства,  РФ,  г.  Якутск

DIAGNOSTICIAN  DIROFILARIADEA  (DIROFILARIA  IMMITIS)  MUNICIPAL  DOGS

Kokolova  Luidmila

doctor  of  veterinary  sciences,  manager  by  the  laboratory  of  helmintology  Yakutskii  researche  institute  of  agriculture,  Russia,  Yakutsk

Kasjanova  Sardana

graduate  student  of  laboratory  of  helmintology,  Yakutskii  researche  institute  of  agriculture,  Russia,  Yakutsk

АННОТАЦИЯ

Дирофиляриоз  распространен  в  субтропических  в  регионах  Азии,  Австралии,  Америки  и  Южной  Европы  [1].  В  Якутии,  в  г.  Якутске  и  его  окрестностях  ранее  были  регистрированы  завозные  случаи  инвазии,  а  в  настоящее  время  заболевание  регистрируется  ежегодно  и  численность  заболевших  и  умерших  собак  с  каждым  годом  увеличивается. 

Целью  нашего  исследования  было  изучение  методов  обнаружения  микрофилярий  в  крови  собак  и  проведения  опытов  по  лечению  больных  дирофиляриозом  собак.

ABSTRACT

Dirofilyarioz  is  widespread  in  subtropical  in  regions  of  Asia,  Australia,  America  and  Southern  Europe  [1].  In  Yakutia,  in  Yakutsk  and  its  vicinities  there  were  registrirovana  brought  in  cases  of  an  invasion  earlier,  and  now  the  disease  is  registered  annually  and  the  number  of  the  diseased  and  dead  of  dogs  increases  every  year. 

Studying  of  methods  of  detection  of  mikrofilyariya  in  blood  of  dogs  and  carrying  out  experiments  on  treatment  of  patients  dirofilyariozy  dogs  was  the  purpose  of  our  research.

Ключевые  слова:  дирофиляриоз;  собака;  инвазия;  сердце;  кровь;  микрофилярия;  зооноз.

Keywords:  dirofilaridea;  canis;  invasia;  cors;  gore;  microfilaria;  zoonozie.

Дирофиляриоз  —  трансмиссивное  зоонозное  инвазионное  заболевание,  вызываемое  нематодами  подотряда  Filariata  Skrjabin,  1915,  и  характеризующееся  сердечными,  легочными,  почечными,  кожными  и  другими  осложнениями.  Дирофиляриозом  болеют  дикие  плотоядные,  собаки,  кошки  и  человек.  Возбудители  заболевания  —  нематоды  семейства  Onchocercidae  (Leiper,  1911,  sub.-fam.)  Chabaud  et  Anderson,  1959,  виды:  Dirofilaria  immitis  (Leidy,  1856);  Dirofilaria  (Nochtiella)  repens  (Railliet  et  Henry,  1911);  Dipetalonema  (Acanthocheilonema)  dracunculoides  (Cobbold,  1870);  Dipetalonema  (A.)  reconditum  (Grassi,  1890);  Dipetalonema  (A.)  grassi  (Noe,1907).  У  собак  паразитируют  несколько  видов.  Вид  Dirofilaria  immitis  половозрелые  формы  нематод  обнаруживают  в  правой  половине  сердце  и  легочной  артерии;  вид  Dirofilaria  repens  —  в  подкожной  клетчатке;  вид  Dipetalonema  dracunculoides  —  в  полости  тела;  Dipetalonema  reconditum  —  в  околопочечной  жировой  ткани;  Dipetalonema  grassi  —  как  в  полости  тела,  так  и  в  подкожной  и  межмышечной  соединительной  ткани.  Личиночные  формы  упомянутых  филярий  —  микрофилярий  локализуются  в  крови  собак,  за  исключением  Dipetalonema  grassi,  личинки  которых  обитают  в  лимфе  соединительнотканных  элементов.

С  клинической  точки  зрения  вид  Dirofilaria  immitis  вызывает  тяжелые  патологические  изменения  в  сердце,  легочной  артерии,  легких,  печени  и  других  органов  у  собак.  Кроме  того  Dirofilaria  immitis  и  Dirofilaria  repens  являются  зоонозами  и  там  где  болезнь  эндемична,  существует  риск  развития  легочных,  подкожных  и  других  поражений  у  человека.

Учитывая,  что  клинические  признаки  дирофиляриоза  собак  являются  неспецифичными,  решающее  значение  при  постановке  диагноза  имеет  лабораторные  исследования  с  целью  выявления  микрофилярий  в  крови.  Нами  в  лабораторных  условиях  применены  четыре  метода  обнаружения  микрофилярий  в  крови  собаки:  метод  тонкого  фиксированного  мазка  с  окраской  по  Романовскому-Гимза;  метод  толстой  раздавленной  капли;  метод  обогащения  Кнотта;  метод  центрифугирования  с  дистиллированной  водой. 

Брали  кровь  для  исследования  до  5  мл,  в  качестве  антикоагулянта  использовали  5  %-ный  раствор  цитрата  натрия  в  соотношении  1:20,  исследуем  в  день  взятие  пробы.  При  исследовании  методом  тонкого  фиксированного  мазка  с  окраской  по  Романовскому-Гимза  взятую  пробу  крови  тщательно  перемешиваем,  наносим  каплю  на  предметное  стекло,  с  помощью  шлифованного  стекла  делаем  тонкий  мазок,  высушиваем,  фиксируем  этиловым  спиртом  10  минут  и  окрашиваем  по  Романовскому-Гимза,  окрашенные  мазки  промываем  проточной  водой  и  подсушиваем,  затем  изучаем  под  малым  увеличением  микроскопа,  таким  образом,  микрофилярии  обнаружены  в  6  (13,3  %)  пробах  из  45  исследуемых  нами  мазков.  Самый  простым  и  быстро  выполнимым  методом  исследования  для  нас  был  исследование  толстой  раздавленной  капли  крови.  Пробирку  со  взятой  пробой  крови  также  тщательно  встряхивали,  затем  наносили  3  капли  на  предметное  стекло,  накрывали  покровным  стеклом  и  сразу  же  исследовали  под  малым  увеличением.  Находили  подвижных  микрофилярий  всегда  даже  при  малой  микрофиляремии,  т.  е.  единичные  (фото  1).  Таким  образом,  мы  обнаружили  из  45  проб  для  исследования  в  10  пробах.  Проведение  исследования  методом  Кнотта  по  сложнее,  к  1  мл  добавляем  10  мл  2  %-ного  раствора  формалина.  Смесь  центрифугировали  5  минут  при  скорости  1500  об./мин.  Насадочную  часть  сливаем,  оставляя  1  мл  и  порционно  и  исследовали  по  малым  увеличением  микроскопа.  Метод  классический  и  показывает  высокую  эффективность  даже  при  низкой  микрофиляремии,  микрофилярии  были  обнаружены  в  10  пробах,  но  этот  метод  не  дает  возможность  исследовать  жизнеспособность  микрофилярий,  так  как  личинки  под  действием  формалина  фиксируются  и  погибают,  под  микроскопом  мы  обнаруживали  не  подвижные  и  прямые  личинки.  Четвертый  способ  исследования  метод  центрифугирования  крови  с  дистиллированной  водой  (Ястреб  В.Б.,  2004)  [2],  перед  исследованием  кровь  тщательно  перемешивали,  в  пробирке  с  объемом  10  мл  1  мл  крови  и  добавляли  до  10  мл  дистиллированной  воды,  отстаивали  5  минут,  центрифугировали  при  скорости  2000  об./мин.  Надосадочную  часть  пробы  до  1  мл  сливали  и  отставшую  часть  порционно  переносили  на  предметное  стекло  и  накрывали  покровным  стеклом,  в  этом  случае  личинки  оставались  подвижными  и  живыми.  В  этом  случае  обнаружили  микрофилярии  в  10  пробах  с  интенсивностью  от  1—2  до  15—20  личинок  в  1  мл  крови. 

Как  показали,  наши  исследования  все  методы  эффективны  для  обнаружения  микрофилярий  в  исследуемых  пробах  крови,  однако  предпочтительно  для  нас  были  методы  центрифугирования  с  дистиллированной  водой  (Ястреб  В.Б.,  2004)  и  толстой  раздавленной  капли  крови,  так  как  в  них  .  обнаруженные  личинок  микрофилярий  оставались  жизнеспособными,  и  использовали  их  в  дальнейшем  в  лабораторных  опытах  по  изучении  жизнеспособности  микрофилярий.  В  исследованных  из  45  проб  в  10  пробах  обнаруживали  микрофилярии  вида  Dirofilaria  immitis. 

Нам  также  известно,  что  вид  Dirofilaria  immitis  вызывает  наиболее  тяжелые  патологические  изменения  сердца  и  часто  приводит  к  гибели  животных.  При  вскрытии  павших  животных,  дирофилярий  находили  в  правом  желудочке  и  в  полости  легочной  артерии  скопление  половозрелых  нематод  в  количестве  15  в  первом  случае  и  35  экз.  во  втором,  на  месте  локализации  паразитов  наблюдали  тромбоз  и  гиперемия  стенки  желудочка  (фото  2). 

Лечение  дирофиляриоза  должно  быть  комплексным  и  основываться  на  определение  интенсивности  инвазии,  тяжести  течения,  с  учетом  сочетания  в  организме  собак  с  другими  заболеваниями.  Первую  очередь  мы  проводили  ряд  комплексных  диагностических  исследований:  клинический,  биохимический  анализ  крови,  мочи  и  фекалий.  Анализы  крови  иногда  позволяли  обнаруживать  сопутствующие  патологию  в  почке  или  печени,  исследование  УЗИ  обнаружило  мочекаменную  болезнь  почки  и  в  другом  случае  мочевого  пузыря,  исследование  фекалий  показало  паразитирование  и  других  видов  гельминтов,  в  данном  случае  токсакар.  Электро-  и  эхокардиография  помогает  диагностировать  и  выявить  риск  развития  тромбоэмболии.  Перед  лечением  дирофиляриоза,  согласно  классификации  Raynaud  (1992),  подразделяли  больных  собак  по  симптоматике  и  течении  инвазии  на  три  класса:

класс  1  —  субклинические  и  слабые  симптомы  болезни  было  4  случая;

класс  2  —  умеренная  степень  заболевания  —  4  случая;

класс  3  —  тяжелая  форма  болезни  (сердечная)  —  2  случая.

По  данной  квалификации  мы  в  опытах  были  определили  три  группы.

В  первой  опытной  группе  —  4  собаки  со  слабым  субклиническим  симптомом  болезни.  Проведена  поддерживающая  терапия  и  специфическое  лечение. 

Во  второй  группе  —  4  собаки  с  умеренным  степенем  заболевания,  проведена  сложная  поддерживающая  терапия  и  специфическое  лечение. 

В  третьей  группе  —  2  собаки  контроль,  без  проведение  специфического  лечения,  только  поддерживающая  терапия. 

Результаты  опытов:  в  первом  случае  с  слабым  симптомом  болезни  при  выявлении  в  крови  единичных  микрофилярий.  Лечение  проведена  по  схеме:  до  введения  антипаразитарного  препарата  был  задан  антигистаминный  препарат  тавегил  в  дозе  0,05  мг/кг,  антикоагулянт  гепарин  подкожно  0,5  мл.,  затем  проведена  специфическая  терапия  антгельминтным  препаратом  абиктин,  перорально  в  дозе  0,05  мг/кг.  Выздоровление  наступило  100  %-ный  эффект  при  однократном  пероральном  применении  абиктина  в  дозе  0,05  мг/кг  в  сочетании  с  тавегилом  и  гепарином.

Во  второй  группе  опытных  собак  при  умеренной  степени  заболевания,  проведение  сложной  поддерживающей  терапии  лечения  и  специфическое  лечение  было  необходимо  для  профилактики  осложнений.  При  поддерживающей  терапии  применены  препараты:  сердечный  рибоксин,  улучшающие  циркуляцию  крови  трентал,  антикоагулянты  —  в  двух  случаях  аспирин  (таблетка)  и  двух  гепарин  (инъекция),  иммуностимуляторы  ронколейкин,  а  также  как  гепатопроектор  эссенциале  форте  и  специфическое  лечение  антипаразитарным  препаратом  абиктин  перорально  в  дозе  0,05  мг/кг.  Назначение  антикоагулянта  при  поддерживающей  терапии  исключает  возможность  закупорки  сосудов  микофиляриями  или  половозрелыми  дирофиляриями  возникающих  при  применении  антгельминтных  препаратов,  применение  антигистаминных  препаратов  снижает  риск  аллергии,  сердечные  препараты  поддерживают  сердечнососудистую  систему  организм,  в  частности  работу  сердце,  иммуностимуляторы  необходимы  для  восстановление  защитной  функции  организма.  Антигельминтный  препарат  абиктин,  в  данном  случае  был  применен  трекхкратно,  задан  в  дозе  0,05  мг/кг  с  интервалом  в  три  дня,  поддерживающая  терапия  в  течение  месяца  после  проведения  трехразовой  дегельминтизации. 

В  контрольной  группе  собак  —  с  тяжелой  формой  болезни,  была  проведена  только  поддерживающая  терапия,  дачей  препарат  тавегил  в  дозе  0,05  мг/кг  и  инфузионная  терапия  (различные  солевые  и  коллиодные  растворы),заболевание  была  с  летальным  исходом.  При  вскрытии  контрольных  животных  были  обнаружены  в  правом  желудочке  и  в  полости  легочной  артерии  половозрелые  нематоды  Dirofilaria  immitis  в  одном  случае  15  экземпляров,  во  втором  35  экземпляров,  многочисленные  яйца  гельминтов  в  крови  паразитирование  многочисленных  микрофилярий.

Выводы.  Таким  образом,  на  территории  г.  Якутска  и  его  окрестностях  зарегистрирована  местная  инвазия  дирофиляриоза  собак,  что  указывает  на  необходимость  тщательной  регистрации  и  анализа  каждого  случая  выявления  заболевания  собак,  определение  района  содержания  животного,  выявление  районов  с  наибольшим  риском  заражения  и  распространения  данной  инвазии,  усовершенствование  методов  диагностики,  терапии  и  профилактики  дирофиляриоза  городских  собак.  Необходимо  предупредить  заболевание,  чем  вылечить.  Профилактика  дирофиляриоза  в  первую  очередь  заключается  в  недопущении  контакта  животного  с  кровососущими  насекомыми.  Конечно,  Якутия  является  одним  из  регионов,  где  кровососущих  насекомых  достаточно  много,  их  можно  встретить  везде  и  значительном  количестве,  а  борьба  с  ними  не  приносит  положительных  результатов.  Поэтому  необходима  защита  животных  во  время  лета  комаров,  для  уничтожения  и  отпугивание  переносчиков  дирофилярий  можно  использовать  интектициды  и  репелленты,  а  против  личинок  в  водоемах  —  ларвициды  (фентион,  дурсбан),  но  они  обладают  сильным  токсическим  действием  для  животных  и  человека,  экологически  опасны  для  окружающей  нас  среды.

Список  литературы:

1. Акбаев  М.Ш.  Паразитология  и  инвазионные  болезни  животных.  /  М.Ш.  Акбаев.  Уч.средних  спец.учеб.заведений.  М.  Колос,  2001.
2. Ястреб  В.Б.  Сравнительное  изучение  методов  обнаружения  микрофилярий  в  крови  собак.  /В.Б.  Ястреб.  Мат.докл.научн.конф.  вып.  5.  М.  2005  —  с.  443—445.