МЕТОДЫ ГИСТОЛОГИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА ЖЕНСКИХ ЭМБРИОНАЛЬНЫХ ГОНАД КУР И ЯИЧНИКОВ РАННИХ СРОКОВ ОНТОГЕНЕЗА

METHODS OF HISTOLOGICAL ASSESSMENT OF THE QUALITY OF CHICKENS’ FEMALE EMBRYONIC GONADS AND OVARIES OF EARLY ONTOGENESIS

Irina Mirzakaeva

master's student, Department of Bioecology, Saint-Petersburg State University of Veterinary Medicine,

Russia, Saint-Petersburg

Ekaterina Demina

master's student, Department of Bioecology, Saint-Petersburg State University of Veterinary Medicine,

Russia, Saint-Petersburg

АННОТАЦИЯ

Статья содержит гистологический протокол подготовки тканей эмбриональных гонад кур и яичников раннего этапа онтогенеза.

ABSTRACT

The article contains a histological protocol for the preparation of tissues of chickens’ embryonic gonads and ovaries of the early stage of ontogenesis.

Ключевые слова: гистологический протокол, эмбриональные гонады, куры, сельскохозяйственная птица, яичники кур.

Keywords: histological protocol, embryonic gonads, chickens, poultry, chicken ovaries.

Гистологические исследования являются неотъемлемой частью научного познания в области медико-биологической практики. Исследования гистологических образцов используется для диагностики различных заболеваний, понимания патологии тканей, изучения морфологических особенностей и структур разных этапов развития и жизнедеятельности организмов. Гистологические исследования применяются и в ветеринарной практике. При разработке новых методик и усовершенствования имеющихся немаловажен факт доказательности и верификации нововведений. Один из способов оценки качества – морфологические изменения тканей [2, с. 1].

Изготовление гистологических препаратов – сложная процедура, требующая внимания к деталям и имеющая множество нюансов, часть из которых определяется только эмпирически. Протоколы подбираются индивидуально под каждую лабораторию в зависимости от условий и реагентов и для каждой исследуемой ткани [1, с. 4-5].

Актуальны подходы для изучения морфологической структуры эмбриональных гонад – предшественников яичников и семенников у птиц. Морфологические изменения показывают степень развития гонад, морфо-патологические процессы, позволяют оценить васкуляризацию органа.

Целью проведенных исследований являлась разработка протокола для приготовления гистологических препаратов женских эмбриональных гонад кур (Gallus gallus domesticus).

Эмбриональные ткани, в частности гонады куриных эмбрионов, характеризуются небольшими размерами и нежной структурой, что усложняет проведение гистологических исследований. Изготовление препаратов эмбриональных гонад целесообразно в возрасте 7-17 суток. Чем больше возраст, тем легче проводить манипуляции по изъятию материала и дальнейшей подготовке. Женские гонады обладают более рыхлой структурой, требующей аккуратности и внимательности в обращении на всех этапах протокола.

В качестве материала использовались эмбриональные гонады породы русская белоснежная, возраст исследуемых эмбрионов составил 8 суток. Проводили вскрытие яиц и извлечение гонад под стереомикроскопом с малым увеличением (х20). Половые гонады иссекались от близлежащих тканей и помещались в фиксирующую смесь (раствор Буэна) на 24 часа. Далее осуществляли гистологическую проводку материала. Аналогично проводилось извлечение яичников у суточных цыплят после эвтаназии.

Приведенный протокол (таблица 1) является модификацией протокола для эндоскопических биоптатов «Ассоциации специалистов в области лабораторной гистотехнологии» и рекомендаций компании Биовитрум для биопсийных препаратов [4]. Этапы исследований проводились на основании рекомендаций по гистологической технике [1, 3].

Таблица 1.

Протокол проводки эмбриональных гонад

После проводки материала проводили заливку образцов в парафин и последующую микротомию с толщиной среза 4 мкм. Далее окрашивали образцы гематоксилин-эозином (таблица 2).

Таблица 2.

Протокол окрашивания эмбриональных гонад

После окрашивания срезов, препараты монтировались в консервирующую среду. После высыхания проводили микроскопию. Микрофотографии срезов представлены на рисунках 1 и 2. Препараты хорошо прокрашены, четко видны морфологические структуры и слои (мозговой и корковый).

Рисунок 1. Половая гонада восьмисуточного куриного эмбриона

Рисунок 2. Яичник суточного цыпленка. Окраска гематоксилин эозин

На рисунках 1 и 2 наглядно отражены изменения морфологических структур и толщины коркового слоя у гонады эмбрионального развития и суточного яичника цыпленка.

С небольшими модификациями протокол может быть использован в гистологических лабораториях для получения качественных срезов при проведении эмбриологических исследований.

Список литературы:

1. Мальков, П. Г. Основы обеспечения качества в гистологической лабораторной технике / Мальков П. Г. – Москва : ГЭОТАР-Медиа, 2014. – 176 с.
2. Хохлов Роман Юрьевич Особенности морфологической дифференцировки яичника кур в онтогенезе // Нива Поволжья. – 2009. – №2.
3. Янин В.Л., Бондаренко О.М., Сазонова Н.А. Учебно-методическое пособие для аспирантов очной формы обучения к практическим занятиям по дисциплине «Методы исследования в цитологии и гистологии». Учебно-методическое пособие – Ханты-Мансийск: БУ «Ханты-Мансийская государственная медицинская академия», 2015. – 65с.
4. Ассоциация специалистов в области лабораторной гистотехнологии [электронный ресурс] – Режим доступа. – URL: https://histotechnology.ru/associacija/.