СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ СУММЫ ФЛАВОНОИДОВ В СЫРЬЕ БОРЩЕВИКА СОСНОВСКОГО

Борщевик Сосновского является нефармакопейным растением и обладает богатым фитохимическим составом. Он содержит около 10 % сахаров, до 16 % белков, дубильные вещества, эфирное масло, флавоноиды, глютамин, витамины С и Р, фолиевую кислоту, галатон, арабан, вещества кумаринового ряда, 17 аминокислот, макро- и микроэлементы [2, 3, 4].

Немалый интерес для медицины представляют флавоноиды – вещества полифенольной природы, обладающие широким спектром биологического действия.

Цель исследования – количественное определение флавоноидов в растительном сырье борщевика Сосновского спектрофотометрическим методом и подбор оптимальных условий их извлечения из сырья борщевика Сосновского.

При определении флавоноидов наиболее распространен метод дифференциальной спектрофотомерии.

Методика определения:

Аналитическую пробу сырья измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм. Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещали в колбу с кипелками вместимостью 100 мл со шлифом, прибавляли 30 мл экстрагента, соединяли с обратным холодильником и нагревали на водяной бане при температуре 60°C в течение 1 часа. Экстракцию проводили дважды в описанных выше условиях. Полученные извлечения фильтровали через бумажный фильтр «синяя лента» в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводили объем раствора экстрагентом до метки (раствор А). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещали 1,0 мл раствора А, 2 мл 10 % этанольного раствора алюминия хлорида и 0,1 мл кислоты хлористоводородной разведенной, объем доводили до метки 70 % этанолом. Через 20 минут измеряли оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 410 нм, соответствующей полосе поглощения рутина, в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм.

В качестве раствора сравнения использовали смесь, состоящую из 1,0 мл раствора А и 0,1 мл кислоты хлористоводородной разведенной, доведенной 70 % этанолом до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

Параллельно измеряли оптическую плотность раствора СО рутина, приготовленного следующим образом. Помещали 0,05 г (точная навеска) рутина, предварительно высушенного при температуре 130-135°C в течение 3 часов, в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляли 10 мл 70 % спирта и растворяли на водяной бане при температуре 80°C. Затем раствор доводили 70 % этанолом до метки.

Помещали 0,5 мл раствора в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляли 2 мл 10 % раствора алюминия хлорида, 0,1 мл кислоты хлористоводородной разведенной и доводили объем 70 % этанолом до метки [1].

Содержание флавоноидов в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье (Х) в процентах вычисляли по формуле:

где: D – оптическая плотность испытуемого раствора;

D₀ – оптическая плотность СО рутина;

m – масса сырья;

m₀ – масса СО рутина;

W₁ – объем извлечения, полученный при кипячении растительного сырья с обратным холодильником, мл;

W₂ – объем извлечения, полученный при разбавлении исходного извлечения, мл;

V_ал – аликвотный объем извлечения, взятый для приготовления исследуемого раствора, мл;

W_{1 ст} – объем раствора исходного стандартного образа, приготовленный при растворении навески рутина, мл;

W_{2 ст} – объем испытуемого стандартного образца, приготовленный при разбавлении исходного раствора, мл;

V_{ал. ст.} – аликвотный объем исходного стандартного образца, взятый для приготовления испытуемого раствора, мл;

b – потеря в массе при высушивании сырья, %.

Для установления полноты флавоноидов из растительного сырья борщевика Сосновского изучали влияние температуры экстрагирования. Экстрагирование пробы сырья проводили 70 % этиловым спиртом по методике, описанной выше. Экстракцию проводили дважды по 60 минут при кипячении и температуре 60°С в 6 повторениях каждый.

Результаты исследований и соответствующие метрологические характеристики представлены в таблице 1.

Таблица 1

Результаты влияния температуры экстрагирования сырья борщевика Сосновского 70 % этиловым спиртом на содержание суммы флавоноидов

В результате экстрагирования сырья 70% этиловым спиртом при температуре 60°С содержание флавоноидов составляло 1,24 %; при кипячении – 1,28 %. Метрологическая оценка предложенной методики показала, что относительная ошибка методики с доверительной вероятностью 90 % составляет не более 5% и находится в пределах случайной ошибки.

Список литературы:

1. Ларькина М.С. Количественное определение флавоноидов в наземной части василька шероховатого/ М.С. Ларькина, Т.В. Кадырова, Е.В. Ермилова, Е.А. Краснов // Химико-фармацевтический журнал. – 2009. – Т. 43. - №6. - стр. 14-17.
2. Орлин Н.А. Об извлечении кумаринов из борщевика // Успехи современного естествознания. - 2010. - №3. - с. 13-14.
3. Практикум по растениеводству: Учеб пособие для высших с.-х. учебн. завед. / П.П. Вавилов, В.В. Гриценко, В.С. Кузнецов/ под ред. П. П. Вавилова. – М.: Колос, 1983. – 352 с.
4. Jain S.R. Investigation on essential oil of Heracleum mantegazzianum Somm. et Lavier. // Planta med. 1969. Bd. 17, H. 3. S. 230-235.