ОПРЕДЕЛЕНИЕ  ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ  СПЕРМАТОГЕННОГО  ЭПИТЕЛИЯ  В  РАЗНЫЕ  СТАДИИ  ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ  МЕТОДОМ  МОДЕЛИРОВАНИЯ

Ибрагимова  Хадича  Обитджон  кизи

Ибрагимова  Робияхон  Олим  кизи

студенты  1  курса,  кафедра  «Гистологии,  цитологии  и  эмбриологии»

ТашПМИ,  Республика  Узбекистан,  г.  Ташкент

E -mail:  me.xadicha@gmail.com

E-mail: 

Дустматов  Абдукодир  Тешабоевич

научный  руководитель,  доцент  кафедры  «Гистологии,  цитологии  и  эмбриологии»  ТашПМИ,  Республика  Узбекистан,  г.  Ташкент

Сперматозоиды  относятся  к  одним  из  мельчайших  клеток,  которые  содержат  цитоплазму  и  органеллы  в  малом  количестве.  Это  в  свою  очередь  увеличивает  их  чувствительность  к  внешним  факторам,  поэтому  изучение  влияния  различных  факторов  на  процесс  сперматогенеза  является  актуальным.

Процесс  сперматогенеза  довольно  сложный,  т.  к.  в  эпителии  семенного  канала  одновременно  можно  различать  сперматогенные  клетки  на  различных  стадиях  дифференцировки,  что  способствует  влиянию  введенных  в  организм  веществ  на  сперматогенные  клетки,  находящиеся  на  различных  стадиях  дифференцировки.

Поэтапное  изучение  данного  влияния  показывает  степень  чувствительности  сперматогенных  клеток  на  разных  стадиях  развития,  в  какой  степени  они  подверглись  воздействию,  что  в  свою  очередь  имеет  огромное  значение  в  медицинской  практике.

В  данной  статье  изучено  состояние  сперматогенных  клеток  на  разных  стадиях  сперматогенеза  после  единичного  введения  гормона  гидрокортизон  в  организм  белой  крысы.

Изученный  материал  и  метод  исследования

Опыт  проводился  на  белых  крысах  возрастом  21  недели,  в  мышцы  которых  вводился  препарат  дозой  25  мг  на  100  г  массы  тела.

Опыт  проводился  в  две  серии-  по  6  самцов  крыс  в  2  группы.

Процесс  сперматогенеза  у  крыс  длиться  56  дней,  поэтому  опыт  проводится  в  8  недель,  для  изучения  влияния  гормона  гидрокортизон  на  разные  стадии  сперматогенеза

В  крыс  первой  группы  препарат  введен  1  раз,  вторая  группа  служила  контрольной  группой.  После  этого  в  течении  8  недель  самцы  сводились  с  чистыми  самками 

I  этап  (случка  через  неделю)  —  влияние  на  сформированные  и  формирующиеся  сперматозоиды

II  этап  (случка  через  2  недели)  —  показывает  влияние  препарата  на  зрелые  сперматиды

III  этап  (случка  через  3  недели)  —  показывает  влияние  препарата  на  средние  сперматиды 

IV  этап  (случка  через  4  недели)  —  показывает  влияние  препарата  на  ранние  сперматиды  и  сперматоциты

V  этап  (случка  через  8  недель)  —  показывает  влияние  препарата  на  стволовые  клетки  т.е.  гонии. 

При  этом  в  течении  к  каждому  самцу  ДОБАВИЛИ  по  2  самки,  такой  процесс  проводился  5  раз.

У  самок  на  17—19  дни  беременности  изучалась  половая  система,  в  результате  которого  определено  количество  живых  —  А,  мертвых  —  Б  эмбрионов,  В  —  количество  желтых  тел.

При  оценке,  индуцированной  ДЛМ  (доминантная  летальная  мутация)  количество  смертей:

·     До  имплантации  вычислены  по  формуле:  В-(А+Б)  /В;

·     После  имплантации  вычислены  по  формуле:  Б/А+В

·     Общее  количество  погибших  эмбрионов:  В-А/В

Различия  между  контрольной  группой  и  подопытной  группой  рассчитаны  по  способу  «ФИ».

Полученные  опыты  и  их  анализ.

В  следствие  введения  в  организм  самцов  гормона  гидрокортизона  (25  мг  на  100  г  массы  тела) 

В  результате  скрещивания  самцов  через  неделю  после  введения  гормона  гидрокортизон  (25  мгм  на  100  г  массы  тела)  с  нормальными  самками  в  поколении  доимплантационная  смертность  была  до  некоторой  степени  выше  по  сравнению  с  контрольной  группой  (табл.№  1).  Так,  в  опыте  смертность  показала  отметку  18,1  %,  в  то  время  как  в  контрольной  группе  эта  отметка  равна  6,0  %,  с  учетом  этого  смертность  плода  также  возрастает.

Эти  же  показатели  полученные  в  результате  скрещивания  самцов  через  две  недели  после  введения  гормона  гидрокортизон  резко  снизились: 

·     Доимплантационная  смертность  в  подопытной  группе  равна  0,0  %

·     Доимплантационная  смертность  в  контрольной  группе  равна  35,0  %

·     Общая  смертность  плода  в  подопытной  группе  равна  0,0  %

·     Общая  смертность  плода  в  контрольной  группе  равна  36,0  %

В  поколении,  полученном  в  результате  скрещивания  самцов  через  3  недели  после  введения  гормона  гидрокортизон  количество  смертности  плода  снова  выросла

·В  подопытной  группе  равна  32,1  %

·В  контрольной  группе  15,7  %

Результаты  скрещивания,  произведенного  через  4  недели  после  введения  в  организм  самца  гормона  гидрокортизон  в  контрольной  группе  существенных  изменений  не  показали,  но  пост  имплантационная  смерть  в  некоторой  степени  уменьшилась: 

·В  подопытной  группе  4,08  % 

·В  контрольной  группе  85,0  %

Результаты  скрещивания,  произведенные  через  8  недели  после  введения  гормона:

·доимплантационная  смертность  в  подопытной  группе  5,0  %;

·доимплантационная  смертность  в  контрольной  группе  13,1  %;

·постимплантационная  смертность  в  подопытной  группе  1,9  %;

·постимплантационная  смертность  в  контрольной  группе  7,5  %.

Таблица  1. 

По  полученным  данным  можно  сказать,  что  причиной  увеличения  смертности  эмбрионов  после  первой  и  третьей  недели  является  влияние  гидрокортизона  на  сперматида  и  зрелые  сперматозоиды.  Таблица  №  1:  Быстрота  доминантной  летали  после  единичного  введения  гормона.

Диаграмма  1.  Смертность  сперматогенных  клеток  на  разных  этапах  дифференцировки  в  подопытной  группе

Это,  в  свою  очередь  характеризуется  уменьшением  эффективности  скрещивания  и  после  первой  недели  этот  показатель  уменьшился:  в  подопытной  группе  8,3  %,  в  контрольной  группе  25  %,  а  после  трех  недель  этот  показатель  увеличился:  в  подопытной  группе  33,3  %,  в  контрольной  группе  75  %.

Постимплантационная  смертность  при  скрещивании  после  четырех  и  восьми  недель  несколько  снизилась.  Так  после  четырех  недель  в  подопытной  группе  4,08  %,  в  контрольной  группе  84  %,  после  восьми  недель  в  подопытной  группе  1,9  %,  в  контрольной  группе  7,5  %,  однако  при  этом  скрещивании  эффективность  скрещивания  увеличилась:

·в  подопытной  группе  41,6  %  и  83,3  %;

·     в  контрольной  группе  8,2  %  и  66,7  %. 

Итак,  результаты  скрещивания  после  4й  и  8й  недели  показали,  что  сперматоциты  и  стволовые  клетки  за  счет  гемотестикулярного  барьера  не  подверглись  действию  препарата.

Количество  доимплантационная  смертности  вычислено  отношением  желтых  тел  яичника  относительно  количества  имплантаций  и  это  в  свою  очередь  дало  возможность  определить  частоту  неоплодотворённой  яйцеклеток.  (А.М.  Малышенко,  Х.Х.  Семёнов)

Исходя  из  этого  можно  сказать  что  снижение  эффективности  скрещивания  в  течении  1,  2  и  3  недель  и  другие  изменения  не  имеют  генетического  характера,  а  снижение  эффективности  осеменения  сперматозоидов  есть  влияние  препаратов  на  капацитацию  сперматозоидов.

Вывод

1.  Влиянию  гормона  гидрокортизон  подвергаются  по  большей  мере  чувствительные  клетки-  развивающиеся  и  развитые  сперматогенные  клетки  (сперматиды  и  сперматозоиды),  а  молодые  и  стволовые  клетки  не  подвергаются  влиянию  гормона.

2.  Высокие  показатели  изменений  показывают  на  влиянии  гидрокортизона  на  постмейотическое  клетки.

Список  литературы:

1.Лакин  Г.Ф.  Биометрия-М.:  Высшая  школа,  —  стр.  245.

2.Малашенко  А.М,  Семенов  Х.Х.  Некоторые  закономерности  клинического  мутагенеза  у  лабораторных  млекопитающих  —  стр.  87—93.

3.Райцина  С.С.  Сперматогенез  и  структурные  основы  его  регуляции. 

4.Шрам  Р.  Сравнительная  чувствительность  на  доминантные  летали  и  цитогенетического  анализа  хромосомных  аберраций  в  клетках  костного  мозга  и  сперматоцитах  млекопитающих.  Генетические  последствия  загрязненности  окружающей  среды.  —  стр.  132-14.