ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ГОЛУБОЙ ГЛИНЫ В ТЕРАПИИ БОЛЬНЫХ АКНЕ

Введение

Акне (acne vulgaris) – это хронический рецидивирующий воспалительный дерматоз с вовлечением сальных желез и волосяных фолликулов. Акне относится к наиболее распространенным заболеванием кожи, которое в различной степени тяжести отмечается практически у всех подростков (до 95%). Так как данное заболевание поражает преимущественно открытые участки кожи (лицо – 99%, спина – 60%, грудь – 15%), оно является значимым стрессовым фактором для пациентов, снижает их самооценку, ограничивает во многих сферах общественной жизни и в отдельных случаях приводит к появлению попыток суицида. Лечение акне является одной из важных проблем современной дерматологии.

В патогенезе заболевания выделяют 4 основных звена: 1) гиперпродукцию кожного сала; 2) патологический фолликулярный гиперкератоз; 3) колонизацию кожи P. аcnes; 4) развитие воспаления в коже. В последнее время появляется все больше данных о том, что воспаление предшествует развитию гиперкератинизации воспалительного фолликула, а патологический фолликулярный гиперкератоз создает благоприятные анаэробные условия для развития Р. acnes. Важную роль в воспалении играет сама анаэробная палочка P. acnes, однако существуют и другие микроорганизмы, вызывающие воспалительные реакции. Таким образом, уточнение возбудителя воспалительного процесса очень важно в разработке дальнейшей терапии, которая сможет воздействовать сразу на 2 патогенетических фактора.

Актуальность

Существующие методы лечения воспалительных заболеваний кожи, к числу которых относится акне, имеют ряд недостатков, основным из которых является развитие резистентности микроорганизмов к применяемым антибиотикам. Современные исследования доказывают, что минералы, содержащиеся в глине, могут стать альтернативой антибиотикам: работа, возглавляемая Линдой Уильямс из Университета штата Аризона продемонстрировала антибактериальную эффективность глины из месторождения в области Кратерное озеро в Орегоне, причем именно голубая глина дала наилучшие результаты, как при воздействии на эпидермальный стафилококк, так и при воздействии на метициллин-резистентный золотистый стафилококк.

Существует 2 основных механизма, обуславливающих бактерицидное действие голубой глины: 1) глина создает в раневой среде тот диапазон рН, который благоприятствует исцелению и убивает вторгшихся бактерий; 2) в глине содержится высокий уровень железа. Бактериям используют этот минерал для поддержания своей жизнедеятельности. Однако, железа, содержащегося в голубой глине, слишком много для железо-накапливающих белков бактерий. В результате, происходит окисление избытка железа и образование молекул, которые повреждают клетки и убивают бактерии.

Результаты исследования

В Калининградской области были найдены значительные запасы глауконита (глины), которые могли бы найти свое практическое применение в медицине. На кафедре фундаментальной медицины Медицинского института БФУ им.И.Канта было принято решение о последовательном изучении антибактериальных свойств обнаруженной глины.

В исследовании принимало участие 43 человека (25 девушек и 18 юношей) в возрасте от 14 до 29 лет. Хронические заболевания в анамнезе отсутствуют.

Была проведена работа по идентификации микроорганизмов с использованием метода взятия мазков из содержимого воспалительного очага и посева материала на питательную среду. С помощью 70% раствора этилового спирта проводилась дезинфекция кожи пациента вокруг пустулы. Пустула прокалывалась иглой, содержимое собиралось стерильным тампоном и далее производился посев. Использовались следующие питательные среды: среда Чистовича (желточно-солевой агар, для высевания стафилококков), красный кровяной агар (исследование гемолитических свойств), среда Эндо (для высевания E. сoli) и среда накопления, в которую помещался тампон после нанесения посевов на остальные среды. В случае отсутствия роста, повторный высев производился из среды накопления, что исключало вероятность появления ложноотрицательного результата. Далее производилась инкубация посевов в термостате при температуре 37ᵒС в течении 24 часов.

При идентификации микроорганизмов учитывался размер колоний, форма, поверхность, наличие пигмента, характер краев, выпуклость, гемолитические свойства. На среде Эндо в 43-х случаях рост отсутствовал. На ККА в 7-ми случаях роста не было. При наличии роста вокруг колоний образовывалась зона гемолиза, размером от 3 до 10 мм, прямо пропорциональная размеру колонии. Среда Чистовича дала рост следующим видам микроорганизмов:

1. Staphylococcus epidermidis – колонии, размером 2-5 мм, круглой формы, выпуклые, поверхность гладкая, блестящая, пигмент отсутствовал, края ровные. Выделился в 31-м случае.
2. Staphylococcus aureus – колонии, размером 2-6 мм, круглой или овальной формы, выпуклые, поверхность гладкая, блестящая, края шероховатые, выделялся желтый пигмент, вокруг колонии был виден «перламутровый» венчик (лецитовителазная активность). Выделился в 4-х случаях.

В 7-ми случаях рост на среде Чистовича, как и на ККА отсутствовал, что дает возможность предположить наличие другой флоры во взятом материале у данных участников эксперимента.

После использовался метод серийных разведений для внесения одинаковой дозы испытуемых микроорганизмов в питательные среды. Из рабочей концентрации приготовлены десятикратные разведения до  10^-5.

Были приготовлены следующие разновидности питательных сред: среда для контроля (агар – 20 мл), среда с добавлением простерилизованной голубой глины (агар – 20 мл. + голубая глина 2 гр.), среда с добавлением голубой глины и янтарной кислоты в отношении: 1:20 (агар – 20 мл. + голубая глина 2 гр. + янтарная кислота 0,1 гр.), 1:40 (+ янтарная кислота 0,05 гр.), 1:80 (+ янтарная кислота 0,025 гр.), 1:100 (+ янтарная кислота 0,02 гр.), 1:200 (+ янтарная кислота 0,01 гр.). Данные среды были приготовлены в количестве по 10 каждая, для достижения большей чистоты эксперимента.

При измерении pH сред, среды с янтарной кислотой в соотношении 1:100 и 1:200 были нейтральные, что исключает воздействие на бактерий именно со стороны кислотности и доказывает непосредственное бактериостатическое и бактерицидное действие среды.

Следующим этапом использовался метод посева, в котором взвесь микробов из пробирок с разведением 10^-5, выделенная из клинического материала от 10 из 35 участников эксперимента, засевалась на питательные среды. Все посевы инкубировались при температуре 37 градусов Цельсия в течение 24 часов. При подсчете в контрольных 10 средах среднее число колоний микроорганизмов составляло 180-220, в среде с добавлением только стерилизованной голубой глины наблюдалось незначительное угнетение роста – 70-150 колоний (количество колоний снизилось в 1,4 раза), а в средах с добавлением янтарной кислоты в соотношении 1:20, 1:40, 1:80, 1:100, 1:200 роста микроорганизмов не было.

В ходе дальнейшего исследования, испытуемым (25 человек, из которых 18– девушек и 7 – юношей) было предложено применять стерилизованный глауконит в комбинации с янтарной кислотой (в соотношении 1:200, или 5 г глины к 0,025 г янтарной кислоты) в качестве наружного средства 2 раза в неделю, в течение 2 недель. Оценку эффективности терапии осуществляли путем подсчета количества воспалительных и невоспалительных элементов на исследуемом участке лица, площадью 9 см².

При оценке результатов ставились следующие заключения:

• клиническое выздоровление (при полном исчезновении первичных элементов сыпи на коже);

• значительное улучшение (разрешении высыпаний не менее чем на 70% по сравнению с исходными данными);

• улучшение (при снижении выраженности патологического процесса не менее чем на 25% по сравнению с исходными данными);

• отсутствие эффекта (при снижении выраженности патологического процесса менее чем на 25% по сравнению с исходными данными);

• ухудшение (при отрицательной динамики со стороны кожного процесса по сравнению с исходным состоянием).

Результаты эксперимента: Лечение завершили все 25 человек. Основные сведения о результатах приведены в таблицах 1-2.

В ходе эксперимента помимо уменьшения количества высыпаний все пациенты отмечали, что кожа становилась более сухой, исчезал жирный блеск и уменьшалась краснота вокруг воспалительных элементов. Нежелательные эффекты в виде повышенной сухости, жжения, покраснения отсутствовали.

Таблица 1.

Результаты эксперимента

Таблица 2.

Результаты эксперимента

Выводы

1. При идентификации возбудителей после культивирования выяснилось, что основные возбудители воспалительных элементов в большинстве посевов – это колонии Staphylococcus epidermidis ( в 89% случаев) и Staphylococcus aureus ( в 11 % случаев).

2. Минимальное соотношение янтарной кислоты и глины, необходимое для угнетения роста колоний вышеуказанных  возбудителей,  определяется как 1:200.

3. Эффективность терапии, проведенной на 25 испытуемых, проявляется клиническим улучшением (71,4%) при сохранении высокого уровня безопасности и переносимости глауконита. Поэтому данное соотношение янтарной кислоты и глины можно рекомендовать для использования в комплексной терапии для лечения акне.

Список литературы:

1. Самцов А.В. Акне и акнеформные дерматозы. М., 2009 -  287;
2. Стаценко А.В., Горбунов В.Г., Хайрутдинов В.Р., Шестопалов Н.Е., Антонова О.В. Опыт применения азелаиновой кислоты в терапии больных акне, Санкт-Петербург, 2014;
3. Thiboutot D., Gollnick H. New insights into the management of acne: an update from the Global Alliance to improve outcomes in acne group. J Am Acad Dermatol 2009; 60: 1—50.