СРАВНИТЕЛЬНЫЙ  АНАЛИЗ  РЕЗУЛЬТАТОВ  ОПРЕДЕЛЕНИЯ  ГЛЮКОЗЫ  В  МОЧЕ,  ПОЛУЧЕННЫХ  РАЗНЫМИ  МЕТОДАМИ

Смирнов  Илья  Алексеевич

студент  2  курса  отделения  Лабораторной  диагностики  ГБОУ  СПО  «Медицинское  училище  №  4  ДЗМ»,  РФ,  г.  Москва

E-mail:  nat-mekler@yandex.ru

Меклер  Наталия  Николаевна

научный  руководитель,  канд.  биол.  наук,  доцент,  преподаватель  ПМ01  ГБОУ  СПО  «Медицинское  училище  №  4  ДЗМ»,  РФ,  г.  Москва

Исследование  мочи  часто  позволяет  выявить  как  заболевания  мочевых  путей,  так  и  протекающие  без  первичного  поражения  почек,  заболевания  внутренних  органов,  метаболические  расстройства. 

Анализируя  состав  и  свойства  мочи  в  динамике,  можно  получить  информацию  о  состоянии  различных  систем  органов  пациента,  оценить  степень  тяжести  заболевания,  а  также  сделать  заключение  об  эффективности  проводимого  лечения.

Одним  из  важнейших  показателей  анализа  мочи,  который  исследуется  в  условиях  лаборатории,  является  глюкоза.

Стратегия  получения  этой  информации  менялась  в  ходе  развития  медицины.  В  1776  году  Мэттью  Добсон  определил,  что  моча  диабетиков  содержит  сахар.  В  1815  году  Джин  Биот  предложил  поляриметрический  способ  определения  содержания  оптически  активных  веществ  в  жидкости,  что  позволило  измерять  содержание  глюкозы  в  растворах.  В  1908  году  американский  химик  Стенли  Бенедикт  предложил  метод,  обнаружения  в  моче  глюкозы,  основанный  на  ее  способности  восстанавливать  окись  меди  в  щелочной  среде  сопровождающаяся  появлением  красного,  синего  или  зеленовато-желтого  осадка.  В  1911  году  американский  химик  Хейнц  Гайнес,  основываясь  на  способности  глюкозы  восстанавливать  в  щелочной  среде  при  нагревании  гидрат  окиси  меди  (синего  цвета)  в  гидрат  закиси  меди  (желтого  цвета)  и  закись  меди  (красного  цвета),  предложил  способ  определения  глюкозы  в  моче,  названный  в  его  честь  пробой  Гайнеса.  В  1959  г  советским  ученым  А.Я.  Альтгаузеном,  предложен  метод  количественного  определения  сахара  в  моче,  который  основан  на  взаимодействии  глюкозы  со  щелочью  при  нагревании  с  образованием  окрашенных  соединений.  В  1972  в  Советском  Союзе  был  унифицирован  метод,  основанный  на  использовании  свойства  раствора  глюкозы  вращать  плоскость  поляризованного  луча  вправо,  угол  вращения  которого  зависит  от  концентрации  вещества  [3].

Указанные  физико-химические  исследования  мочи  представляют  собой  достаточно  длительный  и,  в  целом,  сложный  процесс,  требующий  множества  реактивов,  лабораторной  посуды  и  другого  оборудования.  Сегодня  исследование  мочи  на  содержание  глюкозы  упростилось,  стало  легко  выполнимым,  благодаря  появлению  тест-полосок  для  исследования  мочи,  и  более  объективным  благодаря  применению  анализаторов  мочи,  которые  заменили  процедуру  визуальной  оценки  тест-полосок.  Скрининговое  исследование  с  помощью  тест-полосок  на  анализаторе  позволяет  быстро  выявить  патологические  образцы  мочи,  требующие  последующего  количественного  определения  концентрации  белка,  глюкозы  и  обязательного  тщательного  микроскопического  анализа.  Такой  порядок  работы  сокращает  общее  время  исследования  и  повышает  ее  качество.  Простота  работы  на  приборе  и  его  обслуживания,  в  сочетании  с  доступностью  расходных  материалов  и  технической  поддержкой  производителя  делают  данный  прибор  весьма  привлекательным  [2].

Цель  работы:  сопоставимость  результатов  определения  концентрации  глюкозы  в  моче  методом  «сухой  химии»  (тест-полоски  Uriscan10)  визуально  и  с  помощью  анализатора  DocUReader  (Венгрия).

Задачи:

1.  Проанализировать  сведения  об  истории  исследования  изучаемого  показателя  в  моче;

2.  Освоить  алгоритм  проведения  исследования  концентрации  глюкозы  в  моче  с  помощью  «сухой  химии»  и  на  анализаторе  DocUReader;

3.  Провести  исследования  концентрации  глюкозы  в  моче  заявленными  способами;

4.  Сравнить  результаты,  полученные  при  проведении  исследований.

Материалы  и  методы

Изучен  показатель  состава  мочи  —  глюкоза  в  пяти  пробах,  отобранных  случайным  образом,  поступивших  на  исследование  в  клинико-диагностическую  лабораторию  ГБУЗ  «ГП  №  67»  28  апреля  2015  года.  Анализ  проводили  в  течение  1-го  часа  после  поступления  биологического  материала  в  лабораторию.  Сначала  исследования  проводили  визуально,  а  затем  на  анализаторе  DocUReader.

Определение  глюкозы  основано  на  специфической  глюкозооксидазной  реакции.  D-глюкоза  при  участии  фермента  глюкозоксидазы  превращается  в  глюконовую  кислоту  с  образованием  перекиси  водорода,  которая  в  присутствии  пероксидазы  окисляет  индикатор  с  образованием  окрашенного  соединения.

Анализ  мочи  с  применением  диагностических  тест-полосок  визуально.

Исследования  проводились  в  соответствии  с  положениями  инструкции  к  тест-полоскам.  Каждую  пробу  мочи  тщательно  перемешивали  перед  анализом.  Диагностическую  полоску  Uriscan10  погружали  в  мочу.  Избыток  мочи  удаляли  прикосновением  к  мягкой  бумаге,  далее  тест-полоску  соотносили  с  оценочной  шкалой  и  фиксировали  результат.

Анализ  мочи  с  применением  диагностических  тест-полосок  на  анализаторе  DocUReader

Исследования  проводились  в  соответствии  с  положениями  инструкции  к  анализатору  и  тест-полоскам.  Каждую  пробу  мочи  тщательно  перемешивали  перед  анализом.  Диагностическую  полоску  Uriscan10  погружали  в  мочу.  Избыток  мочи  удаляли  прикосновением  к  мягкой  бумаге,  далее  диагностическую  полоску  помещали  на  направляющую  панель  анализатора  DocUReader.  Принцип  действия  прибора:  интенсивность  света,  отраженного  от  поверхности  полоски,  регистрируется  специальными  датчиками  прибора.  В  отраженном  свете  определяется  доля  трех  основных  цветовых  составляющих,  которая,  наряду  с  компенсационной  цветовой  составляющей,  используется  для  расчета  изменения  коэффициента  отражения  (КО  в  %).  Последний  показатель  преобразуется  в  соответствующий  интервал  (в  условных  единицах  +,-),  который  и  выводится  на  чек  [2;  3].

Интервалы  диагностических  полосок  Uriscan10  и  соответствующие  им  концентрационные  диапазоны  определяемых  показателей  представлены  в  таблице  1.

Таблица  1. 

Интервалы  тест-полосок  Uriscan10  (в  условных  единицах  +,-)  и  соответствующие  им  концентрационные  диапазоны,  определяемые  в  моче

При  оценке  визуального  исследования  мочи  нами  были  получены  не  однозначные  результаты,  которые  представлены  в  таблице  2.

Таблица  2. 

Результаты  визуального  исследования  мочи  тест-полосками  Uriscan10

Как  видно  из  таблицы  в  2-х  порциях  (1,  4  проба)  исследуемой  мочи  глюкоза  отсутствует,  то  есть  её  количественное  значение  меньше  100  мг/100мл,  что  является  нормой.  К  референсному  значению  мы  отнесли  и  результат  3-ей  исследуемой  порции.  Реакционная  зона  тест-полоски  окрасилась  в  желто-зеленый  цвет,  что  соответствует  верхней  границе  нормы  —  100  мг/100мл.  В  двух  порциях  биологического  материала  (2,  5  проба)  нами  зафиксировано  отклонение  от  нормы,  цвет  реакционной  зоны  тест-полоски  стал  зеленоватый,  что  соответствует  250  мг/100мл  и  является  глюкозурией.

При  оценке  исследования  мочи  на  анализаторе  DocUReader  нами  были  получены  следующие  результаты:  в  1  и  4-ой  порции  мочи  глюкозы  не  обнаружено  (negative),  во  2  и  3-ей  порции  обнаружены  её  следы  (trace),  в  5-ой  порции  зафиксировано  положительное  содержание  исследуемого  показателя  (positive).

Результаты  проведенных  исследований  мочи  разными  способами  мы  свели  в  таблицу  3.

Таблица  3. 

Сравнительный  анализ  исследования  мочи  с  помощью  тест-полосок  и  на  анализаторе  DocUReader

Как  видно  из  таблицы  3  результаты  исследования  мочи  тест-полосками  и  с  помощью  анализатора  не  одинаковы  в  некоторых  исследуемых  пробах.  Так,  результаты  исследования  1  и  4  порции  мочи  одинаковы.  Визуальная  оценка  2  порции  определила  глюкозурию,  оценка  анализатора  —  следы  вещества  —  что  соответствует  верхней  границе  нормы  —  100  мг/100мл.  Результат  исследования  3  и  5  порции  совпадает.

Таким  образом,  проведенные  нами  исследования  доказывают  достаточно  высокий  (60  %)  уровень  совпадения  визуального  исследования  и  исследования  мочи  на  анализаторе.

Список  литературы:

1. Морозова  В.Т.,  Миронова  И.И.,  Марцишевская  Р.Л.  Мочевые  синдромы.  Лабораторная  диагностика.  Учебное  пособие.  Российская  медицинская  академия  последипломного  образования.  М.,  2003.  —  87  с.
2. Романова  Л.А.  Анализатор  мочи  «LAURA»  —  результаты  клинических  испытаний.  [Электронный  ресурс]  —  Режим  доступа  —  URL:  http:  //  erbalachema.  Ru  /upload  /file/  articles/  Romanova.  рdf
3. Швецова  Д.Г.,  Козлов  А.В.,  Применение  тест-полосок  для  определения  состава  мочи//TERRAMEDICAL.  Журнал  для  врачей.  [Электронный  ресурс]  —  Режим  доступа.  —  URL:  terra-medica.spb.ru›ld2_2006/shvecova.htm  (дата  обращения  12.04.2015).