ПАТОГИСТОЛОГИЧЕСКОЕ  И  ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ  ИССЛЕДОВАНИЕ  РАКА  МОЛОЧНОЙ  ЖЕЛЕЗЫ  В  КАЛИНИНГРАДСКОЙ  ОБЛАСТИ

Парамзин  Фёдор  Николаевич

студент  6  курса,  кафедра  фундаментальной  медицины,  медицинский  институт  БФУ  им.  Иммануила  Канта, 
РФ,  г.  Калининград

Е-mail:  fedia93@gmail.com

Волкова  Лариса  Владимировна

научный  руководитель,  д-р  мед.  наук,  профессор

БФУ  им.  Иммануила  Канта, 
РФ,  г.  Калининград

По  данным  Всемирной  Организации  Здравоохранения  в  мире  ежегодно  выявляется  около  1  млн.  новых  случаев  рака  молочной  железы  (РМЖ),  а  в  Российской  Федерации  –  свыше  50  тысяч.  РМЖ  является  ведущей  онкологической  патологией  у  женщин  (20,9  %),  в  структуре  смертности  наибольший  удельный  вес  (17,0  %)  также  имеют  злокачественные  новообразования  молочной  железы  [3].  Заболеваемость  РМЖ  с  каждым  годом  неуклонно  растёт,  что  может  быть  связано  с  увеличением  влияния  различных  провоцирующих  факторов:  гормональных  изменений,  генетических  мутаций  и  других  экзогенных  и  эндогенных  воздействий  [2].  В  России  в  2013  году  выявлено  60  701  новых  случаев  РМЖ,  тогда  как  в  2012  году  этот  показатель  был  равен  56  154,  на  поздних  стадиях  болезни  (III–IV)  РМЖ  диагностировали  у  33,0  %  и  31,9  %  женщин  в  2012  г.  и  2013  г.,  соответственно.  В  развитии  рака  молочной  железы  существенную  роль  играют  предшествующая  патология  –  фиброзно-кистозная  мастопатия,  фиброаденома  и  масталгия.

Современная  диагностика  опухолей  требует  не  только  верификации  гистологического  варианта  и  степени  дифференцировки  новообразования,  но  и  проведение  иммуногистохимического  (ИГХ)  исследования  РМЖ,  позволяющего  определить  факторы,  влияющие  на  лечение  и  прогноз  [4].

Цель  настоящего  исследования  –  изучение  региональных  особенностей  РМЖ  по  патогистологическим  и  ИГХ-показателям  в  Калининградской  области  за  2014–2015  гг.

Материалы:  проанализировали  результаты  определения  гистологических  и  иммуноморфологических  характеристик  опухолей  в  248  репрезентативных  случаях  рака  молочной  железы  за  период  с  апреля  2014  г.  по  январь  2015  г.  (исследования  выполнены  в  лаборатории  иммуногистохимической  и  патологоанатомической  диагностики  Клинико-диагностического  центра  БФУ  им.  И.  Канта,  зав.  лаб.  –  проф.,  д.м.н.  Волкова  Л.В.)

Методы:

1. микроскопическое  исследование  гистологических  срезов,  окрашенных  гематоксилином  и  эозином,  определение  степени  злокачественности  по  Elston-Ellis,  цифровая  микроскопия  с  использованием  микроскопа  Leica  DM  4000;
2. иммуногистохимическое  определение  экспрессии  рецепторов  эстрогенов,  прогестерона,  маркера  пролиферации  Ki-67,  белка  Her2/neu  при  автоматической  окраске  парафиновых  срезов  на  иммуногистостейнере  BONDmax  c  использованием  антител  Novocastra;
3. статистическая  оценка  данных  с  помощью  программы  Excel  10.0;

Результаты

1. Тип  патогистологического  материала.

Более  чем  в  половине  случаев  (60,5  %)  исследовали  трепанобиоптаты  молочной  железы,  в  39,5  %  –  операционный  материал.  Трепанобиопсия  позволяет  на  дооперационном  этапе  исследовать  морфологическую  структуру  образца  ткани  и  определить  ИГХ  –  профиль  опухоли,  эффективность  этого  метода  составляет  95  %  и  выше.

2. Локализация  неопластического  процесса,  TNMPG,  стадия  заболевания.

При  оценке  распределения  РМЖ  по  локализации  выявлена  более  высокая  частота  опухолей  в  правой  молочной  железе  (54  %)  по  сравнению  с  левой  (45  %),  первично-множественный  РМЖ  диагностирован  в  1  %  случаев.  По  данным  литературы  как  правая,  так  и  левая  железа  поражаются  одинаково  часто,  первично  множественный  РМЖ  встречается  с  частотой  2,5  %.  Распределение  пациенток  по  стадиям  заболевания:  I  стадия  –  21  (8,46  %)  IIА  стадия  –  31(12,5  %),  IIВ  стадия  –  33(13,3  %),  IVстадия  болезни  наблюдалось  в  3,2  %  случаев.

3. Возраст  пациенток.

Известно,  что  вероятность  заболеть  РМЖ  увеличивается  с  возрастом,  так  вероятность  развития  рака  молочных  желез  в  течение  десяти  лет  составляет  1:  72  для  женщин  возрастной  группы  40–49  лет,  для  женщин  старше  70  лет  –  1:  29  [1].  По  данным  настоящего  исследования  возраст  заболевших  женщин  варьировал  от  26  до  87  лет,  средний  показатель  составил  58,7  ±  10,9  лет.

4. Гистологический  тип  опухоли  и  степень  злокачественности  по  Elston&Ellis.

В  изученной  группе  преобладал  инвазивный  протоковый  РМЖ.  При  оценке  степени  злокачественности  использовали  критерии  Ноттингемской  классификации  в  модификации  Elston-Ellis  и  установили,  что  первая  степень  злокачественности  (G1)  наблюдалась  в  24  %  случаев,  вторая  (G2)  –  в  71  %,  третья  степень  (G3)  –  у  5  %  женщин.

5. Иммуногистохимическое  определение  рецепторов  эстрогенов  (ER)  и  прогестерона  (PR).

ER  и  PR  относятся  к  внутриклеточным  рецепторам  стероидных  гормонов,  участвующим  в  механизмах  гормональной  индукции  синтеза  матричной  РНК,  белков,  высвобождении  цитокинов  и  факторов  роста.  Наличие  ER  и  PR  является  благоприятным  прогностическим  признаком,  свидетельствующим  о  чувствительности  опухоли  к  регуляторному  воздействию  экзогенных  гормонов.  В  исследованной  группе  при  оценке  экспрессии  ER  положительный  результат  выявили  у  195  женщин  (81,5  %),  отсутствие  экспрессии  наблюдалось  в  44  случаях  (18,5  %).  Экспрессия  PR  была  положительной  у  172  женщин  (71  %),  отрицательный  результат  выявлен  у  69  случаях  (29  %).

6. Иммуногистохимическое  определение  HER-2/neu.  HER-2/neu  –  тирозинкиназный  трансмембранный  белок,  участвующий  в  передаче  сигналов  факторов  роста,  клеточной  дифференцировки,  апоптоза.  Наличие  гиперэкспрессии  HER-2/neu  является  фактором,  определяющим  чувствительность  опухоли  к  таргетным  препаратам  (трастузумаб).  Оценка  экспрессии  HER-2/neu  проводилась  согласно  рекомендациям  ASCO/CAP.  Установили,  что  положительный  результат  ИГХ-реакции,  т.  е.  амплификация  гена  HER-2,  выявлен  в  27  случаях  (12  %),  слабоположительный  результат  (неопределенный  статус)  –  в  73  случаях  (32  %),  отсутствие  экспрессии  наблюдалось  в  130  случаях  (56  %).
7. Иммуногистохимическое  определение  Ki-67. 

Ki-67  –  ядерный  антиген,  экспрессируемый  в  пролиферативной  фазе  клеточного  цикла  (G1,  S,  G2,  M)  и  отсутствующий  в  фазе  G0;  оценка  экспрессии  Ki-67  позволяет  оценить  пролиферативный  потенциал  опухоли.  При  исследовании  Ki-67  было  установлено,  что  частота  опухолевых  клеток  с  позитивной  экспрессией  Ki-67  варьировала  от  6  %  до  90  %,  средний  показатель  –  37,44  %.  Уровень  пролиферативного  потенциала,  характерный  для  агрессивных  опухолей  наблюдался  в  75,5  %  РМЖ.

Выводы

1. В  Калининградской  области  в  структуре  исследуемого  патогистологического  материала  при  РМЖ  преобладают  трепанобиопсии.  Опухоли  правой  молочной  железы  встречаются  несколько  чаще.  В  большинстве  случаях  РМЖ  заболевание  диагностируется  на  I–II  стадиях  болезни.  Возрастные  показатели  соответствуют  данным  литературы,  отмечаются  случаи  РМЖ  у  молодых  женщин.
2. В  исследованной  группе  больных  с  РМЖ  основной  гистологический  тип  опухоли  –  это  умеренно  дифференцированный  инвазивный  протоковый  РМЖ,  в  2,9  раза  реже  встречаются  высокодифференцированные  опухоли,  низкодифференцированный  рак  выявлен  только  у  5  %  женщин.
3. При  иммуногистохимической  оценке  рецепторов  эстрогенов  и  прогестерона  выявлено  значительное  преобладание  РМЖ  с  позитивной  экспрессией  рецепторов  стероидных  гормонов.  Основную  долю  среди  всех  случаев  РМЖ  составили  опухоли  с  позитивной  выраженной  экспрессией  Ki-67,  характерной  для  агрессивных  опухолей  с  высоким  пролиферативным  потенциалом  (экспрессия  Ki-67  более  20  %).
4. Амплификация  гена  HER-2  диагностирована  в  12  %  случаев,  слабоположительные  результаты  выявлены  у  32  %  женщин,  а  отсутствие  экспрессии  –  в  56  %  опухолей.  Относительно  высокая  частота  неопределенных  результатов  иммуногистохимической  оценки  экспрессии  HER-2/neu,  требующих  проведения  дополнительного  FISH-  исследования,  по-видимому,  связана  с  артифициальными  эффектами  на  стадии  пробоподготовки  и  большой  частотой  трепанобиоптатов  в  исследуемом  патогистологическом  материале.
5. Основным  вариантом  опухоли  был  люминальный  B-тип  HER-2-негативный  подтип  РМЖ  (согласно  классификации  St.Gallen).  Для  этого  рака  характерно:  высокая  степень  экспрессии  стероидных  гормонов  (ER  и/или  PR),  промежуточный  уровень  Ki-67  и  HER-2/neu  –  негативный  статус.

Список  литературы:

1. Корженкова  Г.П.  Скрининг  рака  молочной  железы.  //  Практическая  медицина,  –  2007,  –  №  2,  –  с.  8–11[Электронный  ресурс]  –  Режим  доступа.  –  URL:  http://cyberleninka.ru/article/n/skrining-raka-molochnoy-zhelezy-4  (дата  обращения  29.03.2015).
2. Петров  С.В.,  Райхлин  Н.Т.  Руководство  по  иммуногистохимической  диагностике  опухолей  человека.  –  4-е  изд.  –  Казань,  2012.  –  624  с.
3. Пожарисский  К.М.,  Кудайбергенова  А.Г.  и  соавт.  Клинические  рекомендации  Российского  общества  онкомаммологов  по  патологоанатомическому  исследованию  рака  молочной  железы.  –  Спецвыпуск  журнала  «Опухоли  женской  репродуктивной  системы».  –  2014.  –  10  с.  [Электронный  ресурс]  –  Режим  доступа.  –  URL:  http://www.breastcancersociety.ru/rek/view/29  (дата  обращения  15.04.2015).
4. Dabbs  D.J.  Diagnostic  Immunihistochemistry:  theranostic  and  genomiс  applications.  –  Fourth  Edition.  –  Elsevier  Science.  –  2014.  –  931  p.
5. Dabbs  D.J.  Breast  Pathology.  –  Elsevier  Science.  –  2012.  –  816  p.
6. Rosen  P.P.  Rosen`s  Breast  Pathology.  –  3rd  Edition.  –  2008.  –  Lippincott  Williams  &  Wilkins.  –  2008.  –  1136  p.