Статья опубликована в рамках: XVII Международной научно-практической конференции «Научное сообщество студентов: МЕЖДИСЦИПЛИНАРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ» (Россия, г. Новосибирск, 16 марта 2017 г.)
Наука: Биология
Скачать книгу(-и): Сборник статей конференции
отправлен участнику
ИЗУЧЕНИЕ РОСТА ЛАКТОБАЦИЛЛ НА РАЗЛИЧНЫХ СЕЛЕКТИВНЫХ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕДАХ
В настоящее время во всем мире наблюдается тенденция к расширению спектра пробиотических культур, используемых в функциональном питании, и ужесточаются требования к данным культурам.
При контроле микроорганизмов для молочной промышленности лабораторная служба руководствуется целым перечнем методов, изложенных как в ГОСТированных, так и в отраслевых документах. Так же не существует и универсальной селективной среды для выделения из продуктов и одновременного разделения таксономически далеких друг от друга штаммов.
Цель данного исследования: изучить рост лактобацилл на селективных питательных средах.
Объекты исследований
Для изучения роста лактобацилл на различных селективных средах были отобраны и восстановлены 10 коллекционных штаммов разных видов лактообацилл: L.plantarum L31/1, L.casei Бф11, L.helveticus a28/4, L.acidophilus a35/2 и L35/6, L.rhamnosus pl25/1, L.gasseri L9/1, L.delbrueckii subsp. bulgaricus b18/2, L.delbrueckii subsp. lactis L39/4, L.fermentum L36/2.
Основные методы исследования
Микроскопический препарат определяли по ГОСТ 9225-85 [2].
Измерение рН проводили по ГОСТ 26781-85 [3].
Культивирование бактерий. Бактерии выращивали в жидких или агаризованных средах. Агаризованные среды содержали 0,15% - 2,0% агара. Инкубировали в термостате при различных температурах (30±1°С, 37±1°С, 42±1°С).
Для оценки роста микроорганизмов на различных средах бактерии, выращенные в среде ПГС, рассевали в пробирки с соответствующей селективной средой по шаблону, инкубировали при соответствующей температуре в течении 24 ч, 48 ч и 72 ч, после чего оценивали характер роста образующихся колоний.
Результаты исследований
Для бактерий рода Lactobacillus были выбраны четыре селективные среды: среда Бликфельда, среда Рогоза, среда МРС и среда ГО.
Лактобациллы – грамположительные палочки, отрицательные к каталазе, неподвижны, редко восстанавливают нитраты и в процессе метаболизма утилизируют глюкозу. Могут быть как гомоферментативными, продуцируя более 85% молочной кислоты из глюкозы, так и гетероферментативными, продуцируя молочную кислоту, CO2, этанол и/или уксусную кислоту в равных количествах [5].
При росте лактобацилл в жидких средах наблюдается помутнение среды, осаждение клеток вскоре после прекращения роста. Осадок однородный, изредка зернистый. Поверхностная пленка не образуется. На плотных питательных средах (агар с гидролизованным молоком, МРС-агар и др.) лактобациллы формируют округлые мелкие, размером 2-5 мм, гладкие блестящие колонии серо-белого цвета со сферообразной поверхностью. Колонии лактобацилл разных видов почти не различаются, однако в некоторых случаях наблюдаются колонии шероховатые, волокнистые и др. [4].
Был изучен рост 10 коллекционных штаммов лактобацилл на четырех селективных питательных средах (табл.1). Оценка характера роста исследуемых культур показала, что все виды исследуемых лактобацилл растут на указанных средах, за исключением L.fermentum L36/2, который не вырос на среде ГО.
L.plantarum, L31/1 L.casei Бф11, L.rhamnosus pl25/1, L.delbrueckii subsp. bulgaricus b18/2, L.delbrueckii subsp. lactis L39/4 характеризовались высоким титром (109) на всех питательных средах. У остальных культур (L.helveticus a28/4, L.acidophilus a35/2, L.acidophilus L35/6, L.gasseri L9/1) на всех питательных средах восьмая степень. L.fermentum L36/2 характеризовался хорошим ростом на Рогозе и МРС (1,4 х 109 и 1,7 х 109 соответственно) и отсутствием роста на среде ГО (табл.1).
В количественном соотношении все культуры характеризовались хорошим ростом на средах МРС и Рогоза. Лучший рост для культур: L.helveticus a28/4, L.acidophilus a35/2, L.acidophilus L35/6, L.gasseri L9/1, L.fermentum L36/2 лучший рост был отмечен на средах МРС и Рогоза. Остальные культуры (L.plantarum, L31/1 L.casei Бф11, L.rhamnosus pl25/1, L.delbrueckii subsp. bulgaricus b18/2, L.delbrueckii subsp. lactis L39/4) лучше росли на средах МРС и Бликфельда. L.helveticus a28/4 и L.gasseri L9/1 хуже остальных видов росли на среде Бликфельда, L.helveticus a28/4 и L.acidophilus L35/6 – на среде ГО (табл.1).
В результате исследований установлено, что на 3-х питательных средах (МРС, Рогоза, Бликфельда) растут все исследуемые лактобациллы. На среде ГО не зарегистрирован рост одного вида (штамм L36/2 L.fermentum).
На средах МРС и Рогоза все культуры характеризовались хорошим ростом. На средах Бликфельда и ГО характер роста исследуемых штаммов различался: L.helveticus a28/4 и L.gasseri L9/1 хуже остальных видов росли на среде Бликфельда, L.helveticus a28/4 и L.acidophilus L35/6 – на среде ГО (табл.1).
Таблица 1.
Рост штаммов рода Lactobacillus на различных питательных средах в течение 1 сут культивирования при 37ºС.
|
№ п/п |
Штаммы |
Рост на среде |
|||
|---|---|---|---|---|---|
|
Рогоза |
ГО |
МРС |
Бликфельда |
||
|
1. |
L.plantarum L31/1 |
2,6 х 109 |
2,8 х 109 |
3,0 х 109 |
2,2 х 109 |
|
2. |
L.casei Бф11 |
3,9 х 109 |
3,4 х 109 |
2,5 х 109 |
4,2 х 109 |
|
3. |
L.rhamnosus pL25/1 |
2,4 х 109 |
2,3 х 109 |
2,5 х 109 |
4,2 х 109 |
|
4. |
L.delbrueckii subsp. bulgaricus b18/2 |
1,2 х 109 |
2,3 х 109 |
1,7 х 109 |
2,9 х 109 |
|
5. |
L.delbrueckii subsp. lactis L39/4 |
1,4 х 109 |
1,7 х 109 |
1,9 х 109 |
9,0 х 108 |
|
6. |
L.helveticus a28/4 |
4,0 х 108 |
2,8 х 108 |
4,5 х 108 |
1,2 х 108 |
|
7. |
L.acidophilus a35/2 |
8,5 х 108 |
8,1 х 108 |
8,0 х 108 |
7,5 х 108 |
|
8. |
L.acidophilus L35/6 |
3,7 х 108 |
2,8 х 108 |
3,8 х 108 |
3,2 х 108 |
|
9. |
L.fermentum L36/2 |
1,4 х 109 |
- |
1,7 х 109 |
9,5 х 108 |
|
10. |
L.gasseri L9/1 |
4,1 х 108 |
5,5 х 108 |
4,5 х 108 |
1,0 х 108 |
Список литературы:
- ГОСТ 31928-2013. Средства лекарственные для ветеринарного применения пробиотические. Методы определения пробиотических микроорганизмов. Дата введения 01.07.2014.
- ГОСТ 9225-84. Молоко и молочные продукты. Методы микробиологического анализа. Дата введения 01.01.1986.
- ГОСТ 26781-85. Молоко. Метод измерения рН. Дата введения 01.01.1986.
- Гусев, М. В. Микробиология : учебник / М. В. Гусев, Л. А. Минеева. - 9-е изд., стер. - М. : Издательский центр Академия, 2010. - 464 с.
- Степаненко П.П. Микробиология молока и молочных продуктов // Учебник для ВУЗов. – Сергиев Посад: ООО «Все для Вас – Подмосковье», 2003. – 415 с.
отправлен участнику
Оставить комментарий